鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒和禽肺炎病毒三重RT-PCR检测方法的建立
本文关键词: 鸡新城疫病毒 H亚型禽流感病毒 禽肺炎病毒 三重RT-PCR 检测 出处:《中国兽医杂志》2017年02期 论文类型:期刊论文
【摘要】:本研究建立三重RT-PCR快速检测鉴别鸡新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(AIV)和禽肺炎病毒(APV)的方法。根据Gen Bank中H9亚型AIV HA基因和鸡NDV以及APV F基因的保守序列分别设计合成了三对特异性扩增引物,通过优化反应条件建立了三重RT-PCR检测鉴别鸡NDV、H9亚型AIV和APV的方法。对该方法进行特异性、敏感性和临床样品检测。特异性试验结果显示,所有参试的NDV、H9亚型AIV、APV分别扩增出大小为247 bp、569 bp和424 bp的片段,而对照的其他毒株不扩增;敏感性试验结果表明,本试验建立的方法能检测到10 pg的各自RNA模板。检测临床样品132份,NDV阳性26份,H9亚型AIV阳性6份,APV阳性2份,结果与病毒分离结果一致。PCR阳性产物测序结果与各自毒株序列100%同源。表明本试验建立的三重RT-PCR检测鉴别鸡NDV、H9亚型AIV和APV方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于临床快速、准确的鉴别检测。
[Abstract]:Three pairs of specific primers were designed to detect NDV , H9 subtype avian influenza virus ( NDV ) and avian pneumonia virus ( APV ) by RT - PCR .
【作者单位】: 广西壮族自治区兽医研究所广西动物疫病病原生物学与诊断重点实验室;
【基金】:国家“万人计划”领军人才专项(2016-37) 广西科技厅重点研发计划(桂科AB16380054)和人才专项(桂科AD1638009) 南宁市科学研究与技术开发项目(20152308)
【分类号】:S852.65
【正文快照】: 鸡新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(AIV H9)和禽肺炎病毒(Avian pneumovirus,APV)是危害养鸡业的3种主要病毒,引起的临床症状相似。H9亚型AIV属正黏病毒科流感病毒属中的A型流感病毒,病毒基因组为分节段的单股负链RNA,包含HA、NA、M、PB1、PB2、NP、PA、NS 8个基因组[1]。N
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