副猪嗜血杆菌5型galE基因缺失株HPS-YA-008ΔgalE的构建及鉴定

发布时间：2018-02-23 22:04

  本文关键词： 副猪嗜血杆菌型 自杀性质粒pRE galE基因缺失株　出处：《中国兽医科学》2017年02期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为构建副猪嗜血杆菌5型galE基因缺失株,本研究通过重叠PCR构建了galE基因的上、下游同源臂,然后将其连接到pRE112载体而构建了重组自杀性质粒pRE112ΔgalE;使重组质粒pRE112ΔgalE转化大肠杆菌X7213,与副猪嗜血杆菌接合转移,应用两步法筛选galE基因缺失株HPS-YA-008ΔgalE,用PCR方法验证galE基因的缺失突变。在此基础上进一步研究galE基因缺失株HPS-YA-008ΔgalE的生长特性、药物敏感性、对保育猪的毒力等生物学特性。结果,副猪嗜血杆菌血清5型galE基因缺失株HPS-YA-008ΔgalE构建成功,且缺失株的毒力已经被致弱,对药物的敏感性增加。本试验的研究结果为研制更加安全的副猪嗜血杆菌弱毒疫苗提供了实验材料。
[Abstract]:In order to construct the deletion strain of galE gene of Haemophilus parais type 5, the upstream and downstream arms of galE gene were constructed by overlapping PCR. Then the recombinant suicide plasmid pRE112 螖 galE was constructed by ligating it into pRE112 vector, and the recombinant plasmid pRE112 螖 galE was transformed into Escherichia coli X7213. A two-step method was used to screen HPS-YA-008 螖 galE, and PCR method was used to verify the deletion mutation of galE gene. On the basis of this, the growth characteristics, drug sensitivity, virulence of galE gene deletion strain HPS-YA-008 螖 galE, and so on, were further studied. Haemophilus paraswine serotype 5 galE gene deletion strain HPS-YA-008 螖 galE was successfully constructed, and the virulence of the deletion strain was weakened. The results of this study provided experimental materials for the development of a more safe attenuated Haemophilus parasuis vaccine.
【作者单位】： 四川农业大学动物医学院动物检疫实验室;
【基金】：十二五”国家科技支撑计划项目(2013BAD12B04)
【分类号】：S852.61

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本文编号：1527782