羊泰勒虫病二温式PCR诊断方法的建立及初步应用

发布时间：2018-02-27 10:30

  本文关键词： 羊泰勒虫 表面蛋白基因 二温式PCR　出处：《中国兽医杂志》2017年06期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为建立特异、敏感、快速的羊泰勒虫病诊断方法。根据Gen Bank已报道的羊泰勒虫表面蛋白基因(AY274329)设计合成了1对引物,通过条件优化,建立了羊泰勒虫病二温式PCR诊断方法。该方法能扩增出335 bp的羊泰勒虫特异性基因片段,测序结果与已知基因序列同源性为100%。对羊泰勒虫基因组DNA的最小检测量为16 fg/μL,与新孢子虫、弓形虫、巴贝斯虫和瑟氏泰勒虫均无交叉反应。与普通PCR相比,二温式-PCR在敏感性方面无显著差异,但其反复升温降温时间消耗短。结果表明,二温式PCR诊断方法具有较高的特异性和敏感性,可用于羊泰勒虫病的快速诊断和流行病学调查。
[Abstract]:In order to establish a specific, sensitive and rapid diagnostic method for Taylor's disease, a pair of primers were designed and synthesized according to the surface protein gene AY274329 reported by Gen Bank. A two-temperature PCR method for the diagnosis of Taylor's disease in sheep was established. The results showed that the sequence homology with known gene sequence was 100. The minimum detection of genomic DNA was 16 fg / 渭 L. There was no cross reaction with Neosporidium, Toxoplasma gondii, Babes and Taylor Cervus. There was no significant difference in sensitivity between two temperature and PCR methods, but the time of repeated heating and cooling was short. The results showed that the two temperature PCR diagnostic method had high specificity and sensitivity, and could be used for rapid diagnosis and epidemiological investigation of Taylor's disease in sheep.
【作者单位】： 吉林农业科技学院动物科技学院;预防兽医学吉林省重点实验室;延边大学农学院;
【基金】：吉林省科技发展计划项目(20150623004TC) 吉林省重点学科培育项目(吉农院合字[2015]第x030号) 吉林农业科技学院种子基金项目(吉农院合字[2014]第Z07号)
【分类号】：S858.26;S858.27

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