牛体外受精胚胎抗氧化相关的长链非编码RNA表达谱
本文关键词: 谷胱甘肽 长链非编码RNA 转录组测序 共表达分析 靶基因 出处:《畜牧兽医学报》2017年07期 论文类型:期刊论文
【摘要】:旨在探究培养液中添加3mmol·L~(-1)谷胱甘肽(Glutathione,GSH)对牛体外受精胚胎中长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)表达谱的影响。收集8~16-细胞期和桑椹期的胚胎,构建文库后测序,筛选差异lncRNAs,共表达分析后,获得的差异基因进行GO功能注释和KEGG通路分析;同时对lncRNA进行了顺式作用靶基因的预测及其功能分析;通过荧光定量PCR对8个lncRNAs表达水平进行检测,验证测序结果的准确性。测序共得到4 273个lncRNAs,通过对其表达量、长度和外显子个数分析表明,测序数据的可靠性较好。筛选共得到59个差异lncRNAs(其中23个在对照组(不添加GSH)上调,而在处理组(添加3mmol·L-1 GSH)下调;36个在对照组下调,而在处理组上调),在对照组和处理组中,59个lncRNAs分别与754和2 782个蛋白编码基因共表达,这些基因分别参与47和48个功能分类,且主要富集于5和13条信号通路。对23和36个差异lncRNAs临近的145和154个蛋白编码基因进行GO注释,结果表明,这些基因分别参与35和43个功能分类。14个lncRNAs共表达的差异基因参与谷胱甘肽代谢通路。综上表明,在培养液中添加GSH能导致胚胎lncRNA表达谱的变化。
[Abstract]:The aim of this study was to investigate the effect of 3mmol 路L ~ (-1) glutathione (Glutathione) on the expression profile of RNA(Long non-coding in bovine embryos in vitro fertilization (IVF). The differentially obtained genes were analyzed by go functional annotation and KEGG pathway analysis, and the cis-acting target genes were predicted and their functions were analyzed. Eight lncRNAs expression levels were detected by fluorescence quantitative PCR. To verify the accuracy of the sequencing results, a total of 4 273 lncRNAss were obtained by sequencing, and the expression, length and number of exons were analyzed. The reliability of sequencing data was good. A total of 59 differences in lncRNAss (23 of which were up-regulated in the control group (no GSH added), but down-regulated in the treatment group (adding 3mmol 路L-1 GSH) and 36 in the control group were obtained. However, in the treatment group, 59 lncRNAs were coexpressed with 754 and 2 782 protein coding genes in the control group and in the treatment group, respectively. These genes were involved in 47 and 48 functional classifications, respectively. It was mainly concentrated in 5 and 13 signal pathways. Go annotation was performed on 145 and 154 protein coding genes adjacent to 23 and 36 differential lncRNAs. These genes were involved in 35 and 43 functional classifications respectively. Fourteen differentially expressed genes of lncRNAs were involved in the glutathione metabolism pathway. It was concluded that the addition of GSH to the culture medium resulted in the change of lncRNA expression profile in embryos.
【作者单位】: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;
【基金】:中国农业科学院科技创新工程“家畜胚胎工程与繁殖创新团队”(ASTIP-IAS06-2017) 国家科技支撑项目(2012BAD12B01-2)
【分类号】:S823
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,本文编号:1542390
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