LPS诱导牦牛成纤维细胞TLR4及其信号通路基因表达变化分析

发布时间：2018-03-20 04:27

  本文选题：成纤维细胞　切入点：牦牛　出处：《中国兽医学报》2017年09期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：采用PCR方法从牦牛成纤维细胞中扩增TLR4基因,并用5mg/L质量浓度的LPS诱导牦牛成纤维细胞,分别在0,12,24,36h用实时荧光定量PCR检测TLR4及其信号通路基因(IL-1β、IL-8)mRNA水平的相对表达量。结果显示,克隆得到TLR4基因序列长2 067bp(GenBank号:KU743904),与GenBank中野牦牛TLR4的相似性达99%。5mg/L质量浓度的LPS诱导处理后的各基因与0h相比,在12和24h均有上调,在36h均下调。诱导后24h,TLR4、IL-1β和IL-8基因的表达量均达到最大值,且都显著高于0和36h(P0.05)。由此得出TLR4、IL-1β和IL-8均可在牦牛皮肤成纤维细胞中表达,并参与了对LPS的应答反应。
[Abstract]:The TLR4 gene was amplified from yak fibroblasts by PCR method, and the yak fibroblasts were induced by 5 mg / L LPS. The relative expression of TLR4 and its signal pathway gene, IL-1 尾 -IL-8 mRNA was detected by real-time fluorescence quantitative PCR at 0 ~ 1212 ~ 24 ~ 36 h, respectively. The length of TLR4 gene was 2 067 BP GenBank: KU743904, and the similarity with wild yak TLR4 in GenBank was 99.5mg / L LPS. Compared with 0h, the genes were up-regulated at 12 and 24 hours. The expression levels of IL-1 尾 and IL-8 gene of TLR4 were significantly higher than those of 0 and 36 h after induction, and the results showed that TLR4, IL-1 尾 and IL-8 could be expressed in yak skin fibroblasts, and participated in the response to LPS, and the expression of TLR4TLR4 尾 and IL-8 was significantly higher than that of P0.05 at 0 and 36 h after induction, the results showed that TLR4 and IL-8 could be expressed in yak skin fibroblasts and participate in the response to LPS.
【作者单位】： 西南民族大学青藏高原研究院;西南民族大学生命科学与技术学院;
【基金】：中央高校青年教师基金资助项目(2015NZYQN60) 四川省教育厅重点资助项目(16ZA0014)
【分类号】：S823.85

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本文编号：1637515