新疆某规模化牛场牛传染性鼻气管炎与肠球菌脑膜炎的诊断与防控

发布时间：2018-03-26 02:17

本文选题：犊牛　切入点：牛传性鼻气管炎　出处：《石河子大学》2017年硕士论文

【摘要】：牛传染性鼻气管炎(IBR)又称“红鼻子”,是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)引起牛的一种急性、热性、接触性传染病。IBR牛急性感染牛5-7d后经常继发多种细菌感染,尤其是新生犊牛,可以继发大肠杆菌、巴氏杆菌、链球菌等多种细菌的感染,犊牛发病率和死亡率极高。近年来,新疆部分规模化牛场犊牛发生多例疑似传染性鼻气管炎继发细菌性脑膜炎的病例,给牛场造成了较大的经济损失。为此,本研究首先进行现场流行病学调查,查明可能的发病原因、潜在的传染因素等;然后无菌采集发病犊牛病料,采用PCR方法检测IBRV的核酸并进行序列分析;其次采用常规微生物学结合分子生物学方法,对继发的感染菌进行分离、鉴定及药敏试验,同时观察分离株细菌对小白鼠的感染试验;最后根据现场流行病学调查及检测结果,建立一套有针对性的综合防控方案,包括疫苗的免疫对比试验等。试验结果如下:1.现场流行病学调查现场流行病学调查结果表明,本病发生及传染速度较快,存在垂直传播和水平传播两种方式,潜伏期3-10天不等,发病率达39.64%,死亡率达64.18%,治愈率为26.87%,淘汰率为8.96%。其中0日龄和1-30日龄之间的犊牛占发病率分别为10.65%和15.98%,31-120日龄之间犊牛占总发病率13.01%;0日龄、1-30日龄、31-60日龄的犊牛死亡率分别为72.22%、77.78%和57.14%。本次发病的牛群主要是4月龄以内的犊牛,以呼吸道症状为主并伴有神经症状,剖检可见病死犊牛的脑、肺等组织出血、各个脏器的淋巴结肿大、出血。2.传染性鼻气管炎病毒的PCR检测以及gD基因序列的分析采用PCR方法检测牛传染性鼻气管炎病毒的gD基因,并选取9个PCR阳性产物进行序列比对分析做同源性的比较。结果显示3个不同牧场发病犊牛的IBRV-PCR阳性率达到70%,健康犊牛鼻腔拭子的阳性率达50%,成母牛鼻腔拭子的阳性率35%。不同区域牧场IBRV的同源性存在差异,9株样品的同源性为74.9%-99.3%,与标准株的NZ_LKPI01000049.1的同源性为82.8%-98.2%。所有检测毒株与参考毒株处于一个大的进化分支上,起源相同,但被检毒株之间存在一定的基因变异。3.屎肠球菌的分离、鉴定、致病性及药敏试验采用常规微生物学方法,从濒临死亡犊牛的病样中分离可疑菌,然后对分离株的形态学特征、培养特性、溶血性、致病性、生化特性、分子生物学(tuf基因检测、16S rRNA序列比对分析)以及药物敏感性进行检测。结果表明,7株分离菌均为屎肠球菌,均扩增出肠球菌属细菌的tuf基因片段,且7株分离菌的16S rRNA基因序列与Genbank上登录E.faecaiumNR_042054.1同源性在92.9%-96.5%之间,检测样品之间的同源性在93%-99.2%;结合分离株的各种生物学特性,确定为屎肠球菌。溶血性、小白鼠的致病性和药敏试验结果表明,在5%的绵羊血平板上4株呈现β性溶血、2株为α性溶血,1株未出现溶血性;分离菌经腹腔注射小鼠后在16-26h之间全部死亡;分离株对链霉素、万古霉素、阿奇霉素、环丙沙星、恩诺沙星、头孢噻肟钠、磺胺药物较为敏感,对四环素、卡那霉素、庆大霉素等药物具有一定的耐药性。4.疫苗免疫效价对比试验本试验选取40头产前2个月(干奶期)成母牛,分成两组,一组接种BVD-MD/IBR疫苗,一组注射牛IBR疫苗,14天后加强免疫一次,分别在首免前和免后20天进行尾静脉采血,对试验牛群产后7天的犊牛颈静脉采血,分离血清,检测IBR抗体。结果表明两组试验在未免疫前均出现野毒感染阳性牛,阳性率分别为20%,25%;在怀孕的成母牛实验组中,免疫BVDV/IBR二联灭活疫苗后抗体阳性率为85%,免疫IBR灭活苗抗体阳性率为80%。两组不同疫苗对犊牛主动免疫抗体阳性率分别为75%和63.64%。研究结果表明,引起本次犊牛发病的病原为传性鼻气管炎病毒继发屎肠球菌的混合性感染;结合现场流行病学调查、药敏试验及疫苗对比结果,建立一套集环境改善、药物治疗和免疫接种为一体的综合性防控方案,有效控制了该病在本地区的流行。
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【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S858.23

【参考文献】