利用营养水平诱导新疆哈萨克绵羊产后发情激素变化规律及部分相关基因表达研究

发布时间：2018-04-03 12:33

本文选题：哈萨克绵羊　切入点：乏情期　出处：《石河子大学》2015年硕士论文

【摘要】：新疆是我国绵羊养殖大省,但绵羊的季节性繁殖性状严重制约着新疆绵羊养殖业的发展。绵羊的季节性发情受到下丘脑-垂体-卵巢(hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPG)系统的调控。同时营养对绵羊的发情表现也存在很大影响的,目前的研究表明,绵羊季节繁殖是光周期在其中起到了关键作用,那么这种由营养水平诱导的发情性状与一般认为的光周期调控通路的关系如何?所以本研究以哈萨克羊为研究对象,在乏情期观察其发情表现,检测发情周期中生殖激素变化规律,结合Kisspeptin/GPR54系统和TSH/Dio系统主要关键基因的表达规律,具体内容如下:(1)为了解新疆哈萨克绵羊乏情期血清中4种重要生殖激素孕酮(P4)、雌激素(E2)、促黄体素(LH)和促卵泡素(FSH)浓度,解析新疆哈萨克绵羊乏情期发情绵羊血清中生殖激素变化规律。本试验采用酶联免疫法(ELISA)测定P4、E2、LH和FSH浓度,研究新疆哈萨克绵羊乏情期发情及不发情绵羊体内激素变化。结果表明:乏情期发情绵羊P4的含量显著低于不发情绵羊(P0.05),发情绵羊E2、LH和FSH的含量显著高于不发情绵羊(P0.05),E2的显著变化可以作为舍饲哈萨克绵羊发情的参考指标,测定3天时间内舍饲哈萨克绵羊体内E2含量,若E2含量显著上升时,舍饲哈萨克绵羊的生理状态可能为发情状态。(2)比较新疆哈萨克绵羊乏情期和发情期发情绵羊血清中4种重要生殖激素孕酮(P4)、雌激素(E2)、促黄体素(LH)和促卵泡素(FSH)浓度,解析绵羊乏情期和发情期哈萨克绵羊发情时生殖激素的变化规律,采用ELISA的方法测定4种生殖激素浓度,结果表明:乏情期发情绵羊P4、E2、LH和FSH的浓度显著低于发情期发情绵羊(P0.05),发情母羊P4在发情周期内呈现波动式变化,发情绵羊E2、LH和FSH在发情周期内呈现脉冲式变化;乏情期发情绵羊的发情时间发生在羔羊断奶后的第10-15天,而发情期发情绵羊的发情周期持续时间较长,可以维持整个繁殖季节。乏情期绵羊不发情则是因为LH和FSH的分泌量不足,不足以引起E2和P4的变化,不能引起绵羊的发情。(3)乏情期提高营养水平,诱导哈萨克绵羊发情,检测乏情期哈萨克绵羊血清中4种重要生殖激素孕酮(P4)、雌激素(E2)、促黄体素(LH)和促卵泡素(FSH)浓度,解析绵羊乏情期发情的生殖激素变化规律,为营养因素调控绵羊乏情期发情提供激素方面的理论依据。试验选用36只成年哈萨克绵羊,随机分成两组,高营养试验组补饲精料,对照组正常饲喂,在乏情期对发情及不发情绵羊静脉采血,采用酶联免疫法(ELISA)测定P4、E2、LH和FSH浓度,结果表明:高营养试验组绵羊发情率为44%,要显著高于对照组16%的发情率;营养诱导下,试验组发情绵羊P4、LH和FSH的分泌量显著高于对照组发情绵羊(P0.05);生殖激素P4、LH和FSH与营养水平呈正相关,E2含量变化不明显。试验组生殖激素含量的升高可能与其摄入粗蛋白含量增大相关,营养水平调控激素的变化,进而可以调节绵羊的发情。(4)乏情期提高营养水平,诱导哈萨克绵羊发情,结合kisspeptin/GPR54系统和TSH/Dio系统,检测乏情期哈萨克发情绵羊和不发情绵羊的kiss-1、GPR54、TSH和Dio2基因的相对表达量。采用实时荧光定量PCR的方法,对各个采集组织的相关基因进行分析。结果表明:kiss-1、GPR54、TSH和Dio2基因的表达部位广泛,乏情期发情绵羊的kiss-1、GPR54、TSH和Dio2基因的相对表达量高于不发情绵羊,尤其是在下丘脑中,发情绵羊的kiss-1、GPR54、TSH和Dio2基因的相对表达量显著高于不发情绵羊(P0.05)。kisspeptin/GPR54系统和TSH/Dio系统相关基因的高表达,均会刺激GnRH的分泌,进而刺激LH和FSH分泌,促进E2和P4的分泌,促使乏情期绵羊发情,说明基因表达量的变化和生殖激素的变化是共同影响绵羊发情的的,并不是相互独立影响的。表明:营养调控通路并不是独立影响绵羊发情,可能是在光周期调控系统上游部位发挥作用,促使光周期调控系统中关键基因高表达,促使生殖激素发生改变,最终影响绵羊的发情。
[Abstract]:In this study , the changes of reproductive hormones in sheep were studied by enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) . The results showed that the content of E _ 2 , LH and FSH in sheep was significantly higher than that of non - estrus sheep ( P0.05 ) . ( 2 ) There were four important reproductive hormones progesterone ( P4 ) , estrogen ( E2 ) , progesterone ( LH ) and follicle - stimulating hormone ( FSH ) in sheep serum during estrus and estrus in Xinjiang . ( 3 ) The concentration of 4 important reproductive hormones progesterone ( P4 ) , estrogen ( E2 ) , LH and FSH in the serum of sheep were determined by enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) . The results showed that the relative expression of kiss - 1 , GPRS 54 , TSH and Dio2 genes were higher than those of non - estrus sheep ( P0.05 ) . The results showed that the relative expression of kiss - 1 , GPRS 54 , TSH and Dio2 genes in estrus sheep was higher than that of non - estrus sheep ( P0.05 ) .

【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S826

【参考文献】