双重PCR检测奶牛隐性乳房炎大肠杆菌与无乳链球菌方法的建立及应用
本文选题：大肠杆菌 切入点：无乳链球菌 出处：《畜牧与兽医》2017年10期
【摘要】：为快速检测奶牛隐性乳房炎主要致病菌大肠杆菌和无乳链球菌,分别针对2种致病菌16S-23S rRNA和16S rRNA基因设计2对特异性引物,优化并确立双重PCR反应体系。特异性检测表明,对其他对照菌株未扩增出目的条带;敏感性试验表明,该双重PCR对大肠杆菌、无乳链球菌的最小检测浓度分别为10~2、10~3cfu/mL。同时采用双重PCR与细菌学检查法对送检的96份奶样进行检测,结果双重PCR检出63份大肠杆菌阳性、54份链球菌阳性;细菌学方法检出29份大肠杆菌阳性、37份链球菌阳性。说明本研究建立的双重PCR方法敏感、快速,可用于检测大肠杆菌和无乳链球菌引起的奶牛隐性乳房炎。
[Abstract]:For the rapid detection of mastitis pathogenic bacteria Escherichia coli and Streptococcus agalactiae, 2 specific pairs of primers were designed according to 2 kinds of pathogenic bacteria 16S-23S rRNA and 16S rRNA gene respectively, optimize and establish double PCR reaction system. The specific detection results showed that, the other control strains without amplification purpose bands; sensitivity test showed that the double PCR of Escherichia coli, the minimum detectable concentration of Streptococcus agalactiae were 10~2,10~3cfu/mL. and double PCR and bacteriological examination method for the submission of 96 milk samples were detected. Results 63 samples were positive for Escherichia coli PCR double detection, 54 Streptococcus positive bacteriological methods; 29 positive samples of Escherichia coli, 37 Streptococcus. Double PCR method established in this study is sensitive, rapid, and can be used for detection of Escherichia coli and mastitis caused by Streptococcus lactis.
【作者单位】： 吉林农业科技学院动物科技学院;吉林农业科技学院预防兽医学吉林省重点实验室;
【基金】：吉林省科技厅重点科技攻关项目(20150204024NY) 吉林省教育厅项目(吉教科合字[2016]第205号) 国家级大学生创新项目(201611439025) 吉林省大学生创新项目(2016064) 吉林农业科技学院重点学科项目(吉农院合字[2015]第X50号)
【分类号】：S858.23
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，本文编号：1711294
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