瘤胃真菌分离鉴定及酶学特性

发布时间：2018-04-24 09:07

  本文选题：瘤胃厌氧真菌 + 细胞壁降解酶　； 参考：《农业生物技术学报》2017年10期

【摘要】：厌氧真菌(Neocallimastigomycota)具有很强的植物组织降解能力,是草食动物消化道内一类重要的降解植物细胞壁的功能菌。为筛选可提高粗饲料利用率的高植物细胞壁降解酶活性厌氧真菌,本研究采用亨盖特厌氧滚管技术从西农萨能奶山羊(Capra hircus)瘤胃中分离获得12株真菌菌株,通过形态学观察、核糖体内转录间隔区和28S rDNA D1/D2区基因序列分析确定其分类地位。测定12株真菌的植物细胞壁降解酶活性(木聚糖酶,羧甲基纤维素酶,微晶纤维素酶,乙酰酯酶和β-葡聚糖酶),并对活性最高菌株分泌的木聚糖酶和乙酰酯酶进行酶学特性分析。结果表明,12株厌氧真菌均鉴定为Piromyces属,分别命名为Piromyces sp.CN1~Piromyces sp.CN12,ITS基因序列Genbank登录号为KY368100~KY368111。其中,Piromyces sp.CN6的木聚糖酶、羧甲基纤维素酶和乙酰酯酶活性分别为1655.3、93.4和152.8 m U,显著高于其他菌株(P0.05);Piromyces sp.CN3的微晶纤维素酶活性最高,但与Piromyces sp.CN6差异不显著(P0.05);各菌株间β-葡聚糖酶活性差异不显著(P0.05)。木聚糖酶与羧甲基纤维素酶、乙酰酯酶存在极显著正相关(P0.01),与微晶纤维素酶呈显著正相关(P0.05)。酶学特性表明,Piromyces sp.CN6分泌的木聚糖酶最适反应温度为50℃,最适pH为5.0,该酶在40℃和pH5.0~8.0下较稳定;K~+、Ca~(2+)和Co~(2+)对其有激活作用,Zn~(2+)、Cu~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(2+)和Mn~(2+)抑制该酶活性。乙酰酯酶的最适反应温度为50℃,最适pH为9.0,该酶在40℃和pH 5.0~10.0下较稳定;Mg~(2+)、K+、Ca~(2+)对乙酰酯酶有激活作用,Zn~(2+)、Fe~(2+)、Co~(2+)和Mn~(2+)抑制该酶活性。本研究从奶山羊瘤胃内容物筛选获得的Piromyces sp.CN6具有较高的植物细胞壁降解酶活性,通过酶活测定和酶学特性分析,丰富和完善瘤胃真菌的酶系信息,为深入应用提供依据。
[Abstract]:The enzyme activity of xylanase , carboxymethyl cellulase , microcrystalline cellulose , acetyl esterase and 尾 - glucanase from the rumen of Capra hircus was studied . The results showed that the activity of xylanase , carboxymethyl cellulose and acetyl esterase of Piromyces sp . CN6 was significantly higher than that of other strains ( P0.05 ) . The optimum pH was 5.0 , the enzyme was stable at 40 鈩，

本文编号：1796014