鸡γ-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性研究

发布时间：2018-05-12 21:25

  本文选题：鸡γ-干扰素 + 分泌表达　； 参考：《中国家禽》2017年01期

【摘要】：将克隆的鸡γ-干扰素(Ch IFNγ)基因亚克隆至酵母表达载体p PICZα-A中,构建重组质粒p PIC-Ch IFNγ。将鉴定正确的质粒p PIC-Ch IFNγ线性化,通过电转化整合到毕赤酵母菌株X-33基因组中,得到阳性菌株。经1%甲醇连续诱导4 d,表达产物经SDS-PAGE检测,结果表明Ch IFNγ在酵母中获得了分泌型表达,表达产物分子量约为20 ku。表达产物粗提后以细胞病变抑制法检测其活性,效价为107.69U/m L;在鸡胚中能有效抑制H9N2亚型禽流感病毒的增殖;动物攻毒保护试验结果显示,表达的蛋白具有较好的抗病毒活性。
[Abstract]:The cloned chicken interferon 纬 Ch IFN 纬 gene was subcloned into yeast expression vector p PICZ 伪 -A and the recombinant plasmid p PIC-Ch IFN 纬 was constructed. The identified plasmid p PIC-Ch IFN 纬 was linearized and integrated into the genome of Pichia pastoris X-33 by electrical transformation. The positive strain was obtained. After being induced by 1% methanol for 4 days, the expression product was detected by SDS-PAGE. The results showed that Ch IFN 纬 was secreted in yeast, and the molecular weight of the product was about 20 ku. The activity of the expressed product was detected by cytopathic inhibition assay, the titer was 107.69U/m L, the proliferation of H9N2 subtype avian influenza virus was effectively inhibited in chicken embryo, and the results of animal antivirus protection test showed that the expressed protein had good antiviral activity.
【作者单位】： 青岛易邦生物工程有限公司;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所;
【分类号】：S859.797

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 孙国凤;用酵母分泌表达味觉变革蛋白[J];生物技术通报;1992年12期

2 刘永亮，童克忠;利用枯草杆菌碱性蛋白酶E基因的信号顺序构建分泌表达载体[J];遗传学报;1994年03期

3 孙红立,陈芳,于瑞嵩,刘惠莉,曹祥荣,李震;毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达牛白细胞介素2[J];中国兽医学报;2004年03期

4 夏雨;成玉梁;李达倩;吕源玲;;枯草芽孢杆菌分泌载体构建及其对脂肪酶A的分泌表达[J];安徽农业科学;2011年30期

5 洪斌,李元,李嗣英,姜蓉;鲑鱼降钙素在链霉菌中的分泌表达[J];遗传学报;1998年04期

6 王延群;张璐;李玉明;汪志艳;金家民;刘永刚;王刚;王淑杰;姜成刚;涂亚斌;蔡雪辉;;牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定[J];中国预防兽医学报;2013年10期

7 付世新;齐长学;罗春海;张丽;王瑶;;牛乳溶菌酶在毕赤酵母中的分泌表达及活性分析[J];中国预防兽医学报;2010年06期

8 李英华,白俊杰,简清,叶星,李新辉,罗建仁,梁旭方;鲤生长激素酵母工程菌的分泌表达和产物纯化[J];中国水产科学;2002年04期

9 李方正;;猪OGP蛋白基因克隆及分泌载体的构建与鉴定[J];中国农学通报;2012年29期

10 汪招雄;何启盖;刘军发;刘正飞;陈焕春;;猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅲ A基因的克隆及其在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达[J];中国兽医学报;2007年06期

相关会议论文 前10条

1 郭虹;史江;盛民立;;重组人TPO生物学效应研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年

2 王革;王妍;何凌冰;乔刚;朱一松;王君艳;;酵母分泌表达重组人神经生长因子[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年

3 蒲广西;邓刚;符启骄;周湘龙;符兆理;陈海宁;郝新保;白玉杰;梁国栋;;毕赤酵母发酵生产重组人粒细胞集落刺激因子[A];海南生物技术研究与发展研讨会论文集[C];2006年

4 王富强;周兴军;王彦芳;田雪虹;张谦;贺秉坤;;hG-CSF大肠杆菌分泌表达系统的构建[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年

5 谭树华;吴梧桐;刘景晶;濮颖辉;;在大肠杆菌中信号肽介导水蛭素Ⅲ分泌表达研究[A];第四届中国新医药博士论坛论文集[C];1999年

6 孔宁;周余来;王毅;宿晓云;王芳;丛中一;苏曼曼;侯宜;颜炜群;;重组人抑瘤素M的表达、纯化及鉴定[A];2010施慧达杯第十届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2010年

7 卢雪涛;岳乔红;刘家云;马越云;苏明权;郝晓柯;;羧肽酶A1全酶及其肽段的分泌表达及活性测定[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

8 任洪辉;王永;江明锋;骆美蓉;张林;朱小翌;李建波;;牦牛胃溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及活性分析[A];中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编（2009-2013）[C];2013年

9 刘健;陈瑞爱;朱杰仪;唐明森;罗满林;;猪干扰素-α基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（下册）[C];2009年

10 江丽娜;赵瑞利;韩文瑜;雷连成;欧阳萍;;牛蛙抗菌肽在毕赤酵母中的分泌表达及其活性检测[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（下册）[C];2009年

相关重要报纸文章 前1条

1 特约记者 郝成涛;我军女科学家陈薇荣获“发明创业奖”[N];解放军报;2009年

相关博士学位论文 前10条

1 潘兴亮;枯草芽孢杆菌高效表达系统构建及饲用酶制剂的开发研究[D];中国农业科学院;2016年

2 闻崇炜;活性多肽的分泌表达研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2003年

3 罗紫臣;纤维素酶的分泌表达及其在生物炼制中的应用[D];华东理工大学;2015年

4 陆信曜;Pseudomonas aeruginosa脂肪氧合酶的分泌表达及热稳定性改造[D];江南大学;2013年

5 洪斌;鲑鱼降钙素在链霉菌中的分泌表达[D];中国协和医科大学;1996年

6 杨宇;神经保护短肽体内分泌表达策略和治疗作用的研究[D];吉林大学;2007年

7 关波;改良人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中分泌表达的研究[D];江南大学;2014年

8 周绪霞;Apidaecin功能基团和作用靶位点分析及其在乳酸乳球菌中的分泌表达[D];浙江大学;2008年

9 方自安;分泌信号肽介导异源蛋白在酵母中分泌表达的研究及K1HAP1基因在乳酸克鲁维酵母中的功能研究[D];复旦大学;2009年

10 高新星;枯草芽孢杆菌氨肽酶分泌表达、分子改造及生理功能研究[D];江南大学;2014年

相关硕士学位论文 前10条

1 郝立沙;HP-PRRSV GP5蛋白在酵母中的高效分泌表达及抗体检测iELISA方法的建立[D];中国农业科学院;2015年

2 周勇;嗜麦芽糖寡养单胞菌脂肪酶LipS在枯草芽孢杆菌中的高效分泌表达[D];浙江大学;2015年

3 丁璐妹;毕赤酵母内源信号肽的筛选及头孢菌素C酰化酶的分泌表达[D];华东理工大学;2015年

4 徐春英;高效分泌表达耐热性β-葡萄糖苷酶工程菌的构建[D];南京师范大学;2013年

5 谭成成;2种不同分泌信号对犬干扰素在毕赤酵母中分泌表达的影响[D];吉林大学;2016年

6 黄朝远;猪IFN-γ在毕赤酵母中的分泌表达与功能验证[D];华南农业大学;2016年

7 黄志清;猪干扰素-γ基因在毕赤酵母中的分泌表达及其抗猪瘟病毒活性的研究[D];中国农业大学;2005年

8 范凌云;高效分泌表达内皮抑素的腺病毒载体研究[D];上海交通大学;2009年

9 何正祥;重组人生长激素在大肠杆菌中分泌表达及其纯化的研究[D];安徽大学;2006年

10 申茉函;重组人β淀粉样蛋白1-42在毕赤酵母中的分泌表达[D];吉林大学;2008年

，

本文编号：1880217