淫羊藿总黄酮及其磷酸化修饰物抗鸭病毒性肝炎作用与机理研究
发布时间：2018-05-13 07:40
本文选题：淫羊藿总黄酮 + 磷酸化分子修饰 ； 参考：《南京农业大学》2015年硕士论文
【摘要】：淫羊藿(Epimedium davidii Franch)为我国传统的补益中草药,具有"益精气,坚筋骨,补腰膝,强心力"之功效。随着近年来对其药理学功能的研究日益深入,我们发现淫羊藿总黄酮(Epimedium flavones,EF)为淫羊藿的主要药理有效成分。诸多临床和实验研究表明,其具有抗病毒、抗氧化、免疫增强等效果。然而,由于黄酮类水溶性较差,在实际临床应用时经常会造成一定的不便。为此,本研究着眼于提高地淫羊藿总黄酮的生物利用率,更好地发挥其抗病毒效果,为其在临床推广应用服务。本研究采用磷酸化分子修饰,通过正交试验得到最优修饰条件,将磷酸根取代其本身的羟基,形成磷酸化淫羊藿黄酮(phosphated Epimedium flavones,pEF),探究EF、pEF在体外鸭胚肝细胞(duck embryonic hepatocytes,DEHs)上抗 1 型鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus 1,DHV-1)活性、体外抗病毒机制、淋巴细胞增殖和体内增强免疫功能、抗氧化能力的效果并通过干预实验再次验证,旨在研究一种新型抗病毒药物。本试验分为以下五个部分:试验Ⅰ淫羊藿总黄酮的磷酸化分子修饰及结构鉴定本试验旨在研究淫羊藿总黄酮磷酸化修饰的修饰条件及磷酸化修饰物的结构鉴定。首先采用三聚磷酸钠-三偏磷酸钠作为磷酸化试剂,按照L9(34)水平设计正交试验筛选最优修饰条件;然后采用FT-IR、HRESIMS、NMR对修饰后的磷酸化产物进行结构鉴定。试验结果表明,制备磷酸化淫羊藿总黄酮的最佳磷酸化条件为反应温度70℃、反应时间6 h、反应pH=9。经过FT-IR、HRESIMS、NMR比较修饰前与修饰后的结构,我们得出了磷酸化修饰7后淫羊藿苷的分子式为 6"'-磷酸化淫羊藿苷(8-prenylkaempferol-4'-methylether-3-rhamnosyl-7-(6"'-phosphate)-glycoside)。试验Ⅱ淫羊藿总黄酮及其磷酸化修饰产物体外抗鸭肝炎病毒研究本试验旨在研究淫羊藿总黄酮(EF)及磷酸化淫羊藿总黄酮(pEF)在体外抗鸭肝炎病毒(DHV-1)效果。比较了两者抗DHV-1感染鸭胚肝细胞(DEHs)的活性,并采用直接免疫荧光法和real-time PCR法比较两者对病毒吸附、复制、释放的影响。试验结果显示,EF与pEF均能显著提高侵染病毒后的DEHs细胞活性,pEF效果优于EF。两者均能抑制病毒复制及释放,pEF对病毒复制环节的抑制明显优于EF,二者对病毒吸附细胞有一定抑制作用,但二者间无显著差异。试验Ⅲ淫羊藿总黄酮及其磷酸化修饰产物治疗鸭病毒性肝炎及抗氧化损伤作用研究本试验研究了 EF和pEF对DVH的治疗作用和抗氧化损伤作用。180羽j夜妊妓婊，
本文编号：1882275
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