融合表达禽白血病env基因和IgG-Fc基因对鸡免疫效果研究
本文选题:ALV-J + DNA疫苗 ; 参考:《中国预防兽医学报》2017年08期
【摘要】:为研究鸡IgG-Fc作为分子佐剂是否能够增强J亚群白血病病毒env基因核酸疫苗的免疫效果,本研究克隆鸡IgG-Fc、禽白血病病毒-J(ALV-J)env基因,通过overlap-PCR将两个基因串联,构建pcDNA-env-Fc重组质粒,转染HEK293T细胞,48 h后经间接免疫荧光试验证明外源基因能够在细胞内表达。将pcDNA-env-Fc重复免疫SPF鸡3次,记录免疫过程中ALV-J env抗体动态变化,通过ELISA试剂盒检测鸡体内ALV-J env基因特异性抗体含量,结果显示第5周ALV-J抗体水平显著高于对照组(p0.05),尤其是IgG-Fc片段作为分子佐剂比ALV-J env基因疫苗更能显著刺激机体产生抗体。结果表明IgG-Fc片段可以作为ALV-J env基因疫苗有效的分子佐剂。
[Abstract]:In order to study whether chicken IgG-Fc as a molecular adjuvant can enhance the immune effect of env gene nucleic acid vaccine of subgroup J leukemia virus, this study cloned chicken IgG-Fc gene and avian leukemia virus ALV-JNV gene, and constructed pcDNA-env-Fc recombinant plasmid by linking two genes by overlap-PCR. The expression of exogenous gene in HEK293T cells was confirmed by indirect immunofluorescence assay 48 h after transfection. SPF chickens were immunized with pcDNA-env-Fc for 3 times, and the dynamic changes of ALV-J env antibody were recorded. The specific antibody content of ALV-J env gene was detected by ELISA kit. The results showed that the level of ALV-J antibody in the 5th week was significantly higher than that in the control group, especially that the IgG-Fc fragment as a molecular adjuvant could significantly stimulate the production of antibodies compared with the ALV-J env gene vaccine. The results showed that IgG-Fc fragment could be used as an effective molecular adjuvant for ALV-J env gene vaccine.
【作者单位】: 山东农业大学动物科技学院;山东省肥城市畜牧局;山东省滨州兽医研究所;
【基金】:公益性行业(农业)科研专项经费资助(201203055) 山东省农业科学院农业科技创新工程(CXGC2017A01)
【分类号】:S852.4
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本文编号:1908227
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