数字RT-PCR技术检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立

发布时间：2018-05-29 15:46

  本文选题：猪流感病毒 + HN亚型　； 参考：《中国畜牧兽医》2017年06期

【摘要】：试验旨在利用新型荧光探针——分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的H3和N2基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用数字RT-PCR技术检测H3N2亚型SIV。结果显示,该数字RT-PCR检测方法与其他主要相关病毒均不发生交叉反应,重复性良好;对猪H3N2流感病毒而言,最低可检测到106倍稀释的病毒株。数字RT-PCR方法能够对RNA模板定量分析。在H3N2SIV的鉴定上,数字RT-PCR方法较实时荧光定量PCR方法更灵敏、准确。
[Abstract]:The experiment aims to establish a new method for detecting swine influenza virus by using a new fluorescent probe molecular beacon. The specific primers and molecular beacon probes are designed and synthesized according to the conservative gene sequences of the H3 and N2 genes of the H3N2 Subtype Swine Influenza Virus (swine influenza virus, SIV), and the detection of H3N2 subtype S using digital RT-PCR technology. IV. results showed that the digital RT-PCR detection method did not cross reaction with other major related viruses and had good reproducibility. For swine H3N2 influenza virus, 106 times the lowest dilution of the virus strain was detected. The digital RT-PCR method could be used for quantitative analysis of RNA template. In the identification of H3N2SIV, the digital RT-PCR method was more real-time than the real-time quantitative PCR. The method is more sensitive and accurate.
【作者单位】： 湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心;惠州出入境检验检疫局;
【基金】：国家质检总局科技资助项目(2014IK243)
【分类号】：S852.651

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本文编号：1951433