微小隐孢子虫TSP3蛋白的定位分析
本文选题:微小隐孢子虫 + 多肽 ; 参考:《吉林农业大学学报》2017年02期
【摘要】:通过对微小隐孢子虫TSP3氨基酸序列进行生物信息学分析设计多肽片段,偶联KLH载体蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA方法检测血清效价并利用特异性亲和层析的方法纯化抗体。以该抗体作为一抗,利用Western blot检测虫体天然蛋白质在体内的表达情况,通过间接免疫荧光方法进行亚细胞定位分析。结果表明:制备的多克隆抗体能够特异性识别虫体天然蛋白,亚细胞定位发现其位于子孢子以及裂殖子的顶端。
[Abstract]:The peptide fragment was designed by bioinformatics analysis of the amino acid sequence of Cryptosporidium minimus TSP3. The rabbit was immunized with KLH carrier protein to prepare polyclonal antibody. The titer of serum was detected by indirect Elisa and the antibody was purified by specific affinity chromatography. Using the antibody as the first antibody, the expression of natural protein in the insect body was detected by Western blot, and the subcellular localization was analyzed by indirect immunofluorescence method. The results showed that the prepared polyclonal antibodies could specifically recognize the natural proteins of the insect body, and the subcellular localization revealed that they were located at the top of the sporozoite and merozoite.
【作者单位】: 吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室;
【基金】:国家自然科学基金项目(31272549)
【分类号】:S852.7
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,本文编号:2041486
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