血管内皮生长因子对永生化山羊黄体细胞增殖及孕酮分泌的影响

发布时间：2018-07-05 20:58

  本文选题：黄体细胞 + 内皮细胞　； 参考：《西北农林科技大学》2015年硕士论文

【摘要】：本实验为探究血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)与永生化黄体细胞的体外增殖及孕酮分泌之间的相互关系,揭示血管内皮生长因子与血管内皮生长因子受体2(Vascular Endothelial Growth Factor receptor 2,VEGFR-2)在黄体细胞增殖和其发挥孕酮的分泌功能中所起到的作用。本实验采用细胞培养的方法对永生化黄体细胞和永生化内皮细胞进行共培养,采用MTT实验检测细胞增殖情况,并运用ELISA方法对孕酮分泌的变化进行检测,同时用RT-PCR分析孕酮的三种标志酶:STAR1、CYP11A1和3β-HSD的同步变化。本实验所得结果如下:1、外源性VEGF对共培养细胞的增殖情况的改善随浓度的不同而不同,其中,VEGF浓度在10ng/ml和100ng/ml时,在48h时对共培养细胞增殖的促进作用差异显著(P0.05),而在72h时该作用呈现极显著的差异性(P0.001)。2、外源性VEGF对共培养细胞分泌孕酮能力的改善随浓度的不同而不同,该作用在48h和72h时呈现极显著的差异性(P0.001),而在24h是该作用不明显(P0.05)。3、外源性加入SU1498抑制VEGFR-2的活性后,细胞的增殖效应并没有显著变化(P0.05),而在抑制剂中同时加入10ng/ml VEGF诱导因素后,在72h时出现对细胞增殖抑制的现象(P0.05),而加入100ng/ml VEGF诱导因素时,在48h和72h时反而出现显著的促细胞生长现象(P0.01)。4、外源性SU1498加入组与SU1498+VEGF混合加入组在抑制孕酮分泌方面产生的效应基本一致,在48和72h时都可对黄体细胞分泌孕酮的机制产生极显著的抑制效应(P0.001),该效应与VEGF的浓度并不具有显著的关联性。VEGF对黄体细胞共培养体系的增殖作用呈现出一定的时间和剂量依赖性,该促进作用随着时间和剂量的增大而增大,且具有一定的饱和性;受体抑制剂SU1498能够有效的抑制孕酮的分泌,但其对细胞增殖的抑制作用却具有一定的化学诱导性,随着诱导剂VEGF的浓度不同而分别呈现出抑制和促进作用。
[Abstract]:To investigate the relationship between vascular endothelial growth factor (VEGF) and proliferation and progesterone secretion of immortalized luteal cells in vitro. To explore the role of vascular endothelial growth factor (VEGF) and vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR-2) in the proliferation of luteal cells and the secretion of progesterone. In this experiment, immortalized luteal cells and immortalized endothelial cells were co-cultured by cell culture method. The proliferation of immortalized luteal cells and the secretion of progesterone were detected by MTT assay and enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). Meanwhile, the synchronous changes of CYP11A1 and 3 尾 -HSD were analyzed by RT-PCR. The results of this experiment are as follows: 1. The effect of exogenous VEGF on the proliferation of co-cultured cells varies with the concentration of 10ng/ml and 100ng/ml. The effects of exogenous VEGF on the proliferation of co-cultured cells were significantly different at 48h (P0.05), and at 72 h (P0.001) .2.The effects of exogenous VEGF on the secretion of progesterone in co-cultured cells varied with the concentration of VEGF. The effect was significantly different at 48h and 72h (P0.001), but it was not obvious at 24h (P0.05). After the exogenous addition of SU1498 inhibited the activity of VEGFR-2, the proliferative effect of VEGFR-2 was not significantly changed (P0.05), but after the addition of VEGF-induced factors in the inhibitor, At 72 h, the proliferation of cells was inhibited (P0.05), but when 100ng/ml was added, the proliferation of cells was inhibited (P0.05). At 48h and 72h, there was a significant cell growth promoting phenomenon (P0.01). The effects of exogenous SU1498 and SU1498 VEGF on the inhibition of progesterone secretion were basically the same. At 48 h and 72 h, the mechanism of progesterone secretion in luteal cells was significantly inhibited (P0.001), which was not significantly related to the concentration of VEGF. VEGF showed a certain effect on the proliferation of luteal cells in co-culture system. Time and dose dependence, The effect increased with the increase of time and dose, and had a certain saturation. SU1498, a receptor inhibitor, could effectively inhibit the secretion of progesterone, but its inhibitory effect on cell proliferation was chemically induced. The inhibitory and promotive effects of VEGF were observed with the concentration of VEGF.
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S814

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本文编号：2101764