Netrin-1在伪狂犬病病毒触发的抗病毒天然免疫反应中作用的研究

发布时间：2018-07-16 13:27

【摘要】：为探究轴突导向生长因子Netrin-1在病毒感染中的功能,以猪伪狂犬病病毒感染MEF细胞为模型,通过荧光定量PCR检测Netrin-1基因mRNA在感染前后表达水平的变化,结果表明,伪狂犬病病毒刺激可以使得细胞下调Netrin-1 mRNA的表达水平。以小鼠Netrin-1基因保守序列设计1对特异性引物,成功将Netrin-1克隆入pcDNA3.1载体,在MEF细胞中瞬时转染重组质粒,并用伪狂犬病病毒感染细胞,针对炎症因子IL-6、干扰素IFN-β与干扰素刺激基因IFIT1和ISG15的mRNA进行qPCR验证,结果表明,Netrin-1对于干扰素与干扰素刺激基因的表达具有抑制作用。免疫印迹试验结果证明,过表达Netrin-1使得细胞核因子P65亚基表达下调。表明Netrin-1对免疫反应具有抑制作用,细胞在受到病毒感染时下调Netrin-1的表达以促进免疫反应。
[Abstract]:In order to investigate the function of axon oriented growth factor (Netrin-1) in viral infection, the expression of Netrin-1 mRNA in MEF cells infected with porcine pseudorabies virus (PRV) was detected by fluorescence quantitative PCR. Pseudorabies virus stimulation can down-regulate the expression of Netrin-1 mRNA. A pair of specific primers were designed based on the conserved sequence of mouse Netrin-1 gene. Netrin-1 was cloned into pcDNA3.1 vector. The recombinant plasmid was transiently transfected into MEF cells and infected with pseudorabies virus. The expression of IFIT1 and ISG15 mRNA in IFIT-1 and ISG15 was confirmed by qPCR. The results showed that Netrin-1 could inhibit the expression of IFIT-1 and ISG15. The results of Western blotting showed that the expression of nuclear factor p65 subunit was down-regulated by overexpression of Netrin-1. The results indicated that Netrin-1 inhibited the immune response, and the cells down-regulated the expression of Netrin-1 in order to promote the immune response.
【作者单位】： 四川农业大学动物医学院动物生物技术中心;
【基金】：国家级大学生创新计划项目(201410626018) 四川省科技支撑计划项目(2014NZ0043)
【分类号】：S852.65

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本文编号：2126533