致羔羊脑炎粪肠球菌生物被膜形成能力及相关基因检测研究

发布时间：2018-07-31 11:12

【摘要】：为观察致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05株生物被膜(BF)的形成能力并检测致羔羊脑炎粪肠球菌BF形成相关基因的携带情况,本研究以XJ05为研究对象,运用96孔板建立不同时间BF模型,染色后酶标仪测定D595nm值,并用倒置显微镜观察BF形态。同时检测11株菌中与BF形成相关基因(gelE、esp、ace、asa1、asa373、efaA、ef0591、ef3314、ahrc、eep)的携带情况,并对相关基因片段做同源性分析。结果显示,在不同时间段XJ05株BF的生成量与空白对照组相比差异显著(P0.05),24h时D595nm值最高且与其他各个时间段相比均差异显著(P0.05)。显微镜下观察6h时BF初具规模,可见散落的网状结构,12~24h矩阵网格结构明显,24h时形成高度有序的网格结构,24h后网状结构逐渐脱落,BF开始降解。11株菌中10种相关基因的携带情况不同,有6株携带8种基因,1株携带7种基因,1株携带6种基因,1株携带2种基因,有2株未检测到10种基因的任何一种。检出的基因片段同源性均在93.3%~100.0%之间。结果表明,XJ05株能形成完整的BF,11株分离的致羔羊脑炎粪肠球菌中有9株携带部分与BF形成相关的基因。
[Abstract]:In order to observe the ability of formation of biofilm (BF) of Enterococcus faecalis strain XJ05 strain caused by encephalitis of lamb and to detect the carrying of genes related to BF formation of Enterococcus faecalis in lamb, a 96 hole plate was used to establish BF model in different time. After staining, the D595nm value was measured by enzyme labeling instrument, and the morphology of BF was observed by inverted microscope. At the same time, the carrying status of BF formation related gene (Egel Eespacea asa373efa373ef0591F3314ahrccep) in 11 strains of bacteria was detected, and the homology of the related gene fragments was analyzed. The results showed that the BF production of XJ05 strain was the highest at 24 h and significantly different from that of the control group (P0.05). When observed under microscope for 6 h, BF initially took shape. It can be seen that the scattered reticular structure can be seen at 24 hours after forming a highly ordered grid structure. After 24 hours, the reticular structure gradually desquamated and the BF began to degrade. 11 strains of bacteria began to carry 10 related genes differently. There were 6 strains with 8 genes and 1 strain with 7 genes and 1 strain with 6 genes and 1 strain with 2 genes. None of the 10 genes was detected in 2 strains. The homology of the detected gene fragments was between 93. 3% and 10. 0%. The results showed that 9 strains of Enterococcus faecalis isolated from 11 strains of BFN isolated from XJ05 strain could carry some genes related to BF formation.
【作者单位】： 石河子大学动物科技学院;
【基金】：国家自然科学基金(31160507);国家自然科学基金(31260610)
【分类号】：S858.26

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