马流产沙门菌鞭毛重组蛋白FliC的原核表达及对小鼠的免疫保护试验

发布时间：2018-08-06 15:54

【摘要】：为研究马流产沙门菌新疆分离株鞭毛蛋白FliC(flagellin C)的免疫生物学特性及保护特性。本研究利用PCR技术扩增获得该菌的Fli C基因,并将其连接到原核表达载体p ET-28a(+)上,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,用IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE和Western-blot检测与分析表达蛋白,并将纯化的重组蛋白免疫小鼠。结果显示,成功诱导表达了52 ku的重组蛋白,该蛋白第2次免疫小鼠第14天时血清中的特异性Ig G抗体效价可达1∶72 900,且抗体亚型以Ig G1为主,免疫小鼠的攻击保护率可达73%。结果表明,Fli C重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫保护效果。为进一步开展马流产沙门菌亚单位疫苗的研究奠定了基础。
[Abstract]:To study the immunobiological and protective properties of flagellin FliC (flagellin C) of Salmonella equina isolated from Xinjiang. In this study, the Fli C gene was amplified by PCR and ligated to the prokaryotic expression vector p ET-28a (). The recombinant expression plasmid was constructed and transformed into E. coli BL21 (DE3) competent cells. The expressed protein was detected and analyzed by SDS-PAGE and Western-blot induced by IPTG. The purified recombinant protein was immunized with mice. The results showed that the recombinant protein of 52 ku was successfully induced. The specific IgG antibody titer of the second immunization mice reached 1:72 900 on the 14th day, and the antibody subtype was mainly Ig G 1, and the attack protection rate of the immunized mice could reach 73%. The results showed that Fli C recombinant protein had good immunogenicity and protective effect. It lays a foundation for further research on subunit vaccine of Salmonella equine.
【作者单位】： 新疆哈密市动物疫病预防控制中心;新疆农业大学动物医学学院;
【基金】：新疆维吾尔自治区重大科技专项项目(2017A01002-2) 国家自然科学基金项目(31660707)
【分类号】：S852.61

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本文编号：2168217