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伪狂犬病病毒疫苗株SA738侵染BHK-21细胞诱导其凋亡及Caspase3表达情况分析

发布时间:2018-08-06 15:57
【摘要】:旨在深入了解猪伪狂犬病病毒疫苗株PRV SA738侵染BHK-21细胞后,诱导细胞凋亡,细胞凋亡的时间及相关细胞凋亡因子表达情况。通过测定传统疫苗毒株Bartha-K61株和实验室人工筛选的gI-/gE-/PRV SA738病毒株滴度,分别利用2株疫苗毒株侵染BHK-21,采用原位双荧光染色法检测细胞凋亡,用分光光度法测定细胞凋亡因子Caspase-3表达情况。结果表明,低剂量gI-/gE-/PRV SA738疫苗毒株和Bartha-K61疫苗毒株均延迟侵染细胞的凋亡。缺失疫苗毒株gI-/gE-/PRV SA738延迟侵染细胞的凋亡时间比Bartha-K61疫苗毒株时间长,但侵染细胞增殖速度下降。细胞凋亡后期最终细胞死亡,正常细胞细胞死亡后无凋亡小体。gI-/gE-/PRV SA738疫苗毒株和Bartha-K61疫苗毒株侵染细胞凋亡后期凋亡小体形成,并检测到膜结构。在病毒侵染早期细胞内关键凋亡细胞因子Caspase3表现为上调。Caspase-3参与了病毒侵染过程中细胞凋亡的调控。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the apoptosis of BHK-21 cells induced by porcine pseudorabies virus vaccine strain PRV SA738, the time of apoptosis and the expression of related apoptosis factors. The titers of the traditional vaccine strain Bartha-K61 and the gI-/gE-/PRV SA738 virus strain artificially screened in laboratory were determined. The two vaccine strains were used to infect BHK-21, and the apoptosis was detected by in situ double fluorescence staining. The expression of apoptotic factor Caspase-3 was measured by spectrophotometry. The results showed that both low dose gI-/gE-/PRV SA738 vaccine strains and Bartha-K61 vaccine strains delayed the apoptosis of infected cells. The time of delayed infection of gI-/gE-/PRV SA738 vaccine strain was longer than that of Bartha-K61 vaccine strain, but the rate of cell proliferation decreased. After the death of normal cells, there was no apoptotic body. The apoptotic corpuscles formed in the late stage of apoptosis and the membrane structure was detected. During the early stage of virus infection, the key apoptotic cytokines (Caspase3) were up-regulated. Caspase-3 was involved in the regulation of apoptosis.
【作者单位】: 山东省滨州畜牧兽医研究院山东省兽医生物技术重点实验室;山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心;山东绿都生物科技有限公司;
【基金】:山东省自然科学基金资助项目(ZR2012CQ012) 山东省畜牧兽医科技服务业沈志强创新团队项目(鲁发服务[2014]01041号)
【分类号】:S852.65

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