表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性的研究

发布时间：2018-08-19 15:22

【摘要】：为探究表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)纤突糖蛋白(S1)的重组乳酸乳球菌口服免疫动物诱导的特异性免疫应答,本研究从PEDV SDLY株中扩增得到S1基因序列,构建pMG36e-S1重组质粒并将其电转至乳酸乳球菌MG1363感受态细胞中,制备表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的重组乳酸乳球菌。应用SDS-PAGE、Western-blot鉴定目的蛋白的表达。将重组菌口服免疫新西兰大白兔,中和试验检测小肠黏膜和血清中的中和抗体效价,间接ELISA方法测定血清中特异性IgG。结果显示,该重组菌能够有效引起动物体产生较高水平血清IgG和一定量的黏膜免疫中和抗体,表明该重组菌表达系统能刺激动物系统产生免疫应答,具有作为口服疫苗的潜在应用价值。
[Abstract]:In order to investigate the specific immune response induced by oral immunization of recombinant Lactococcus lactis with (PEDV) fibrin glycoprotein (S1) of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV SDLY), the S1 gene sequence was amplified from PEDV SDLY strain. PMG36e-S1 recombinant plasmid was constructed and electroporated into MG1363 competent cells of Lactococcus lactis to prepare recombinant Lactococcus lactis expressing S1 protein of porcine epidemic diarrhea virus. The expression of the target protein was identified by SDS-PAGEN Western-blot. New Zealand white rabbits were immunized with recombinant bacteria orally. Neutralizing antibody titers in small intestinal mucosa and serum were detected by neutralization test and specific IgG in serum were determined by indirect ELISA method. The results showed that the recombinant bacteria could effectively induce the production of high levels of serum IgG and a certain amount of mucosal immune neutralizing antibodies in animals, indicating that the recombinant bacteria expression system could stimulate the immune response of the animal system. It has potential application value as oral vaccine.
【作者单位】： 青岛农业大学动物科技学院;
【基金】：山东省现代农业产业技术体系项目(SDAIT-06-022-08) 青岛市民生科技计划项目(16-6-2-42-nsh)
【分类号】：S852.651

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本文编号：2192061