水貂阿留申病PCR检测方法的建立及应用

发布时间：2018-09-13 15:39

【摘要】：为了对水貂阿留申病毒(ADV)进行快速、准确地鉴定,试验根据基因库中ADV的NS1基因核苷酸序列,设计合成了一对特异性引物,经过反应条件的优化,建立了水貂阿留申病的PCR检测方法,对阳性病料进行特异性核酸扩增及产物测序,并对水貂肠炎细小病毒(MEV)、犬瘟热病毒(CDV)等病原核酸进行扩增检测该方法的特异性;用10倍系列稀释的ADV进行扩增检测敏感性;用该方法检测临床样品并与对流免疫电泳法进行了比较。结果表明:ADV阳性样品有明显目的条带(365 bp)出现,MEV、CDV均无特异条带出现,最低能检测到的病毒核酸量为2.53 ng/μL;临床样品检测表明PCR检出率为90%,对流免疫电泳法检出率为83%。
[Abstract]:In order to identify the (ADV) of mink Aleutian virus quickly and accurately, a pair of specific primers were designed and synthesized according to the nucleotide sequence of NS1 gene of ADV in gene bank, and the reaction conditions were optimized. A PCR method for detection of Aleutian disease in mink was established. The specific nucleic acid amplification and product sequencing were carried out on the positive venereal materials. The specificity of the method was detected by amplification of the pathogenic nucleic acids such as mink enteritis parvovirus (MEV), canine distemper virus (CDV). A 10-fold series diluted ADV was used to detect the sensitivity, and the method was used to detect the clinical samples and compared with the convection immunoelectrophoresis method. The results showed that there were obvious target bands (365 bp) and no specific bands, the lowest detectable amount of virus nucleic acid was 2.53 ng/ 渭 L, the detection rate of PCR and convection immunoelectrophoresis was 90 ng/ 渭 L and 83%, respectively.
【作者单位】： 青岛农业大学;
【基金】：青岛农业大学应用型人才培养特色名校建设工程大学生科技创新基金项目 山东省高等学校优势学科人才团队
【分类号】：S858.92

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本文编号：2241602