大肠杆菌菌蜕制备的初步研究.pdf

  本文关键词：大肠杆菌菌蜕制备的初步研究，由笔耕文化传播整理发布。

Heilongjiang Animal Science 148 and Veterinary Medicine № 7 20 10 大肠杆菌菌蜕制备的初步研究 1，2 2 1 1 3 ， ， ， ， 於 剑 密金玲 艾必燕 黄家政 聂 奎 1． ， 400065 ;2 ． ， 400020 ;3． 重庆市中药研究院 重庆 重庆出入境检验检疫局 重庆 西南大学 ， 4007 15 动物科技学院 重庆 中图分类号:S852 ． 5 文献标识码:B 文章编号:1004 7034 20 10 07 － 0 148 － 03 20 80 ， Henrich B ［1］ 离心管冷却后向其中加入800 L LB ; 世纪 年代 奥地利学者 等 利 μ 液体 培养基 用分子生物学技术将PhiX174 噬菌体的裂解基因E 28 ℃ 、200 r / min 振荡培养60 min ，3 000 / rmin 离心 ， 1 min ; 800 L ， ， 克隆到含温度敏感元件的表达载体中 在温度敏感元 集菌 弃上清液 μ 将剩余菌液吹散混匀 ，E 。E 30 mg / L LB ; 件的调控下 裂解蛋白能够进行限制性表达 基 涂布于含氯霉素 抗性的 固体平板上 91 ， 28 ℃ 4 h ， ; 因编码一个含 个氨基酸的膜蛋白 该蛋白能够融 正向培养 再倒置培养至单个菌落出现 挑 ， LB ， 合革兰阳性菌的内外膜 并在菌膜上形成一个直径为 取单个菌落于 液体培养基中培养 提取质粒并进 行酶切电泳鉴定， 。 40 ～ 200 nm ， 备用 的特异性跨膜孔道 跨膜孔道的形成使 1． 3 E ， 裂解基因 的表达及其裂解动力学 得革兰阳性菌内外渗透压发生改变 细胞内容物由裂 30 L 3 mL ， 取 μ 鉴定正确的菌液接种于 含氯霉素 解孔道排出 生成的这种革兰阳性菌空壳被命名为菌 ［2 － 3］ 抗性的LB 液体培养基中，，28 ℃ 、200 r / min 摇床过夜 bacterial ghost 。 E 蜕 由于 基因灭活过程不会 ; ， 30 mL LB 引起细菌表面结构的任何理化变性， 培养 次日 转接种于 含氯霉素抗性的 液 菌蜕仍保留活菌 ， 体培养基中，

  本文关键词：大肠杆菌菌蜕制备的初步研究，由笔耕文化传播整理发布。