银杏外种皮多糖、黄芩苷抗禽白血病病毒复制作用的研究

发布时间：2018-11-25 18:57

【摘要】：研究背景禽白血病病毒是禽类的致癌性逆转录病毒,能够引起临床肿瘤,目前没有有效药物治疗和预防。国内外研发的抗病毒药物虽然多,但是其毒副作用大,病毒易产生耐药性,而且抗病毒的种类也有限。与西药相比,中药具有耐药性低,毒副作用小等优点,还可以抑制病毒复制和调节免疫功能等特点。根据相关文献报道,银杏外种皮多糖和黄芩苷具有广谱的抗病毒作用,黄芩苷可以抑制属于逆转录病毒的HIV病毒的复制。基于之前的报道本研究首选这两种中药作为抗禽白血病毒的研究。研究目的本研究是在前人研究中药抗病毒活性的基础上,主要利用体外细胞培养法,研究两种常见抗病毒中药,银杏外种皮多糖和黄芩苷对J亚群禽白血病病毒在DF-1细胞中复制与增殖的影响,并进一步探讨中药调节细胞抗病毒的具体机制。研究方法1、采用细胞毒性检测方法对银杏外种皮多糖和黄芩苷在DF-1细胞上的细胞毒性进行测定。利用实时荧光定量PCR方法初步鉴定这两种药物的抗病毒作用。2、体外实验采用实时荧光定量PCR、Western blot、TCID50方法,在感染ALV-J病毒的DF-1细胞中研究银杏外种皮多糖和黄芩苷抗病毒作用及其机制。3、体内实验采用感染ALV-J病毒130日龄家禽作为实验动物模型,分离外周血淋巴细胞,体外进行黄芩苷药物作用,16h后通过流式细胞仪分析不同浓度黄芩苷诱导感染ALV-J淋巴细胞的凋亡比例,初步鉴定黄芩苷促病毒感染细胞的凋亡作用。研究结果1、测定银杏外种皮多糖在DF-1细胞中当药物浓度在200μg/mL时仍然没有细胞毒性,黄芩苷无细胞毒性剂量为20μg/mL。荧光定量PCR结果初步鉴定银杏外种皮多糖和黄芩苷可以显著下调ALV-J病毒gp37基因在DF-1细胞中的表达。2、分别在基因和蛋白水平以及病毒增殖实验中证明银杏外种皮多糖可以有效抑制ALV-J的复制作用。银杏外种皮多糖有效抑制ALV-J病毒复制作用,主要在预处理阶段发挥抑制病毒的功效。同时银杏外种皮多糖还显著下调细胞ISG12-2、TNF-α和IL-1β的表达。这种现象是否与银杏外种皮多糖抑制病毒复制作用直接相关,还有待进一步研究。3、分别在基因和蛋白水平以及病毒增殖实验中证明黄芩苷可以有效抑制ALV-J的复制作用,并呈现出剂量和时间依赖性。黄芩苷促使细胞ISG12-2、TNF-α和IL-1β的表达显著下调,这种现象是否与黄芩苷抑制病毒复制作用直接相关,还有待进一步研究。初步证明黄芩苷可以诱导体外分离培养的ALV-J病毒感染的动物外周血淋巴细胞发生凋亡,并且凋亡比例呈现药物剂量依赖性。结论银杏外种皮多糖和黄芩苷在体外DF-1细胞中均具有明显的抗J亚群禽白血病病毒复制作用。实验发现药物对病毒复制影响的同时还下调病毒感染细胞中ISG12-2、IL-1β、TNF-α细胞因子表达,那么细胞因子的下调是否与抗病毒作用具有直接关联,还有待进一步实验证明。此外,实验结果表明黄芩苷可以诱导ALV-J病毒感染的外周血淋巴细胞发生凋亡,其具体的促凋亡机制有待进一步研究。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S853.7

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 卢科莲;喻小兰;夏纪毅;张宇骄;毛熙光;;黄芩素对宫颈癌细胞凋亡的影响[J];广东医学;2015年03期

2 邹宝仁;;中药在兽医临床中应用的研究进展[J];黑龙江科技信息;2014年24期

3 喻小兰;卢科莲;夏纪毅;毛熙光;;Ras、CyclinD1在宫颈癌中的表达及黄芩素对其表达的影响[J];继续医学教育;2014年02期

4 张春晶;顾立刚;于海涛;;黄芩苷干预甲型H1N1流感病毒感染诱导的A549细胞周期分布及凋亡[J];病毒学报;2011年02期

5 雷芳;;黄芩苷药理作用研究进展[J];中国药业;2010年15期

6 童旭辉;董淑英;陶亮;;黄芩素对人子宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用[J];蚌埠医学院学报;2009年06期

7 吴修华;刘妮;杨丽;沈海容;;黄芩素体内抗甲型流感病毒作用的研究[J];广州中医药大学学报;2009年02期

8 朱伟;孙红光;朱迅;;黄芩苷元对炎症反应的影响[J];中国药理学通报;2009年02期

9 张建军;李洪源;王吉锡;李鑫;朴英爱;陈振华;谢志平;杨庆伟;;甘草活性成分抗呼吸道合胞病毒作用[J];中国公共卫生;2007年06期

10 余建国;;银杏叶多糖对雏鸡肿瘤坏死因子α和γ干扰素产生的影响[J];中国预防兽医学报;2006年05期

相关硕士学位论文 前1条

1 张艳;黄芩苷和黄芩素的抗炎和免疫调控作用研究[D];第二军医大学;2012年

，

本文编号：2357102