猪五种繁殖障碍性疫病病原体多重PCR的建立及初步应用

发布时间：2018-11-26 15:42

【摘要】：为了建立能够同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)的多重PCR,并用于猪场感染情况的动态监控以及临床诊断,根据GenBank中已发表的5种病毒的基因序列,针对CSFV的E2、PRRSV的Nsp2、PRV的gB、PCV2的ORF2和PPV的VP2基因,分别设计了特异性引物。在建立的单项PCR基础上,通过优化反应条件,建立了能同时检测5种病毒的多重PCR,并具有较高的灵敏性和良好的特异性。采用建立的多重PCR对127份疑似病猪的扁桃体活体组织进行检测,检出了5种病毒的存在,其中感染2种及以上病毒的样品比例为38.6%(49/127),表明该方法是一种快速、灵敏、高效的病原学检测手段。
[Abstract]:To establish a multiplex PCR, for simultaneous detection of swine fever virus (CSFV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), porcine pseudorabies virus (PRV), porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine parvovirus (PPV) According to the published gene sequences of five viruses in GenBank, specific primers were designed for ORF2 gene of gB,PCV2 and VP2 gene of PPV for E2PRRSV of CSFV E2PRRSV. On the basis of the single PCR, the multiplex PCR, which can simultaneously detect five viruses was established by optimizing the reaction conditions. It has high sensitivity and good specificity. The multiplex PCR was used to detect the tonsil tissues of 127 suspected pigs. Five viruses were detected. The proportion of samples infected with two or more viruses was 38.6% (49 / 127), which indicated that this method was a rapid method. Sensitive and efficient etiological detection method.
【作者单位】： 上海交通大学农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室;
【分类号】：SS854.44;;S858.28

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