牛传染性鼻气管炎病毒nano-PCR与LAMP及PCR检测方法的对比研究

发布时间：2019-02-15 01:05

【摘要】：本研究应用金纳米颗粒与PCR结合建立了牛传染性鼻气管炎病毒(BoHV-1)纳米PCR(nanoPCR)新型检测方法和LAMP可视化检测方法,并与普通PCR方法进行对比研究。建立的BoHV-1纳米PCR新型分子检测方法和LAMP方法,特异性良好,敏感性与LAMP方法和常规PCR对比结果显示,nano-PCR方法敏感性是LAMP和普通PCR的10倍,最低检出量为2.23×102copies/L,是普通PCR的100倍;LAMP样品检测用时最短,50 min即可得到检测结果。临床样品的阳性检出率nano-PCR方法最高,检出阳性样品8/10份(弱阳性1份),普通PCR阳性检出率最低,检出阳性样品3/10份,LAMP检出6/10份。结果表明,nano-PCR敏感性和特异性更适合于临床样品的检测。
[Abstract]:In this study, a new detection method of bovine infectious rhinotracheitis virus (BoHV-1) nanometer PCR (nanoPCR) and a visual detection method of LAMP were established by combining gold nanoparticles with PCR, and compared with common PCR method. The new molecular detection method and LAMP method for BoHV-1 nanometer PCR have good specificity. Compared with LAMP method and conventional PCR, the sensitivity of nano-PCR method is 10 times higher than that of LAMP and PCR, and the lowest detectable amount is 2.23 脳 102 copiesL / L. 100 times as much as normal PCR; The detection time of LAMP sample is the shortest, and the result can be obtained by 50 min. The positive rate of nano-PCR was the highest in clinical samples, with 8 / 10 positive samples (1 weakly positive), the lowest positive rate was common PCR, 3 / 10 positive samples and 6 / 10 LAMP positive samples. The results showed that the sensitivity and specificity of nano-PCR were more suitable for the detection of clinical samples.
【作者单位】： 中国农业科学院特产研究所农业部经济动物疫病重点实验室特种动物分子生物学重点实验室;东北农业大学;安图县畜牧兽医总站;吉林省动物疫病预防控制中心;
【基金】：吉林省科技厅项目(20150307024NY);吉林省科技厅项目(20170309002NY) “十三五”国家重点研发计划项目(2016YFD0500907)
【分类号】：S852.653

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本文编号：2422797