第2.3.4.4分支H5亚型高致病性禽流感病毒主要抗原位点分析

发布时间：2019-05-22 05:35

【摘要】：为了解第2.3.4.4分支H5亚型高致病性禽流感病毒主要抗原位点,本试验对A/chicken/Yunnan/1/2014与Re-5的HA1蛋白进行比较,对Re-5母本病毒的差异氨基酸位点进行突变,利用反向遗传技术构建重组病毒。用Re-5阳性标准血清进行HI试验,比较重组病毒与Re-5母本病毒的HI滴度,发现D61N、R69K、S145L、S149A、N171D、R178M、Q185R、K234Q、N256H、A279T、V281M、N289H等12个位点改变后导致HI滴度发生改变,是第2.3.4.4分支病毒的主要抗原位点。对2010-2012年第2.3.4.4分支的H5亚型高致病性禽流感病毒的HA序列进行分析,与Re5疫苗株HA1序列进行比对,进行点突变构建重组病毒,HI试验表明,Re5-2010、Re5-2011、Re5-2012、yn2014-Re5与Re5HI滴度分别相差了2,3,4,5个滴度,说明随着时间的推移,病毒变异越来越大。互相替换Re-5和yn2014的HA1或HA2,发现Re5-yn2014与Re5、yn2014-Re5与yn2014的HI滴度一致,说明其抗原位点主要在HA1蛋白区域。这些数据为深入了解该分支病毒的变异和对该病毒的防控提供了技术支持。
[Abstract]:In order to understand the main antigenic sites of highly pathogenic avian influenza virus (H5) in branch 2.3.4.4, the HA1 proteins of A/chicken/Yunnan/1/2014 and Re-5 were compared in this experiment. The differential amino acid sites of Re-5 female parent virus were mutated and the recombinant virus was constructed by reverse genetic technique. The HI titers of recombinant virus and Re-5 female parent virus were compared by HI test with Re-5 positive standard serum. the results showed that D61N, R69K, S145L, S149A, N171D, R178M, Q185R, K234Q, N256H, A279T, V281M, The change of N289H and other 12 loci led to the change of HI titer, which was the main antigenic site of 2.3.4.4 branch virus. The HA sequence of H5 subtype highly pathogenic avian influenza virus in 2.3.4.4 branch from 2010 to 2012 was analyzed and compared with the HA1 sequence of Re5 vaccine strain. The recombinant virus was constructed by point mutation. HI test showed that Re5-2010,Re5-2011, The titers of Re5-2012,yn2014-Re5 and Re5HI were 2, 3 and 4, respectively, indicating that the virus mutated more and more with the passage of time. HA1 or HA2, replacing Re-5 and yn2014 showed that the HI titers of Re5-yn2014 and Re5,yn2014-Re5 were the same as those of yn2014, indicating that the antigenic sites were mainly in the HA1 protein region. These data provide technical support for further understanding the variation of the branch virus and the prevention and control of the virus.
【作者单位】： 中国动物卫生与流行病学中心;
【基金】：青岛市科技计划项目(14-2-4-105-jch) 科技基础性工作专项(2012FY111000)
【分类号】：S852.65

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本文编号：2482720