SP对内蒙古白绒山羊毛囊干细胞增殖和分化影响的研究
发布时间:2019-07-22 12:13
【摘要】:本研究旨在探讨SP对内蒙古白绒山羊毛囊干细胞增殖和分化过程中整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、K1和K10九个基因表达量的研究,为内蒙古白绒山羊毛囊干细胞定向增殖及其诱导分化提供相关的理论基础。1.探寻研究SP对毛囊干细胞的最适增殖浓度,设立0mol/L、1×10-5 mol/L 1×10-6 mol/L,1×10-7 mol/L、1×10-8 mol/L、1×10-9 mol/L六个浓度对毛囊干细胞进行处理,每隔24h每个浓度各取8个孔的细胞进行OD值进行检测,测定各处理组细胞的增殖情况;结果显示,1×10-7 mol/L浓度的SP处理组细胞为本研究最适增殖浓度。2+探寻研究SP对毛囊干细胞的最适分化浓度,根据第一个实验中的各浓度的SP刺激毛囊干细胞,分别提取Od、Id、3d、5d、7d、14d和21d的细胞cDNA为模板采用实时定量PCR方法整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、 KAP8、K1和K10九个基因表达量。结果显示,1×10-7mol/L浓度的SP为本实验研究的最适增殖浓度,1×10-6mol/L浓度的SP为毛囊干细胞定向分化为毛囊细胞的最适分化浓度,1×10-9mol/L浓度的SP为毛囊干细胞定向分化为表皮细胞的最适分化浓度,且存在整合素131、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、 K1和K10在一定的时间点出现高表达的现象。
【图文】:
内蒙古农业大学硕±学位论立3结果与分析逡逑3.邋1细胞总RNA的提取逡逑采用邋RNAiso邋Plus邋提取毛囊干细胞(PS)总邋RNA,邋Agilent邋2100测显示28S和18S带清晰,Rin值为10。说明RNA完整性很进行后续实验。逡逑
3.3.4邋p邋1整合素、S0X9基因、目-act邋i邋n和GADPH的标准曲线及其溶解曲线逡逑选择合适的cDNA模板,按照一定的浓度稀释后进行定量PC民,绘制标准逡逑曲线,结果如图10所示,其溶解曲线如图11所示。逡逑结果显示,(31整合素基因的回归系数1^=0.9964,扩增效率为105.26%;邋SOX9逡逑基因的回归系数1^=0.9924,扩增曲线效率为95.49%;邋p-actin基因回归系数逡逑1^=0.9946,扩增效率为95.6%,邋GADPH基因回归系ex1^=0.998,扩增效率为逡逑119.08%,四个基因的回归系数均大于,均为优化扩增,说明此定量PC民条件可逡逑W用于检测目的基因的相对表达量。逡逑Siandard邋Curve逦Siti^ari邋Cinre逡逑3Ef—-____逦I逦32^^逡逑2化逦^ ̄^ ̄-、逦5逊逡逑?3ff逦???、逦呈到逡逑§ZE逦哉逡逑24j逦邋-叫邋I逦逦逦^逡逑3逦-I逦\逦0逦-3逦-2逦-1逦B逡逑Log邋Concenlialion逦Log邋Cencentr邋曲n逡逑
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S827
本文编号:2517612
【图文】:
内蒙古农业大学硕±学位论立3结果与分析逡逑3.邋1细胞总RNA的提取逡逑采用邋RNAiso邋Plus邋提取毛囊干细胞(PS)总邋RNA,邋Agilent邋2100测显示28S和18S带清晰,Rin值为10。说明RNA完整性很进行后续实验。逡逑
3.3.4邋p邋1整合素、S0X9基因、目-act邋i邋n和GADPH的标准曲线及其溶解曲线逡逑选择合适的cDNA模板,按照一定的浓度稀释后进行定量PC民,绘制标准逡逑曲线,结果如图10所示,其溶解曲线如图11所示。逡逑结果显示,(31整合素基因的回归系数1^=0.9964,扩增效率为105.26%;邋SOX9逡逑基因的回归系数1^=0.9924,扩增曲线效率为95.49%;邋p-actin基因回归系数逡逑1^=0.9946,扩增效率为95.6%,邋GADPH基因回归系ex1^=0.998,扩增效率为逡逑119.08%,四个基因的回归系数均大于,均为优化扩增,说明此定量PC民条件可逡逑W用于检测目的基因的相对表达量。逡逑Siandard邋Curve逦Siti^ari邋Cinre逡逑3Ef—-____逦I逦32^^逡逑2化逦^ ̄^ ̄-、逦5逊逡逑?3ff逦???、逦呈到逡逑§ZE逦哉逡逑24j逦邋-叫邋I逦逦逦^逡逑3逦-I逦\逦0逦-3逦-2逦-1逦B逡逑Log邋Concenlialion逦Log邋Cencentr邋曲n逡逑
【学位授予单位】:内蒙古农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S827
【参考文献】
相关期刊论文 前1条
1 张世红,赵晏;P物质的免疫调节作用[J];生理科学进展;2002年03期
相关博士学位论文 前1条
1 黄晖;P物质调控表皮干细胞β-catenin表达的机制及其在ESC分化中的作用研究[D];第三军医大学;2006年
,本文编号:2517612
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