人参多糖体外抗猪生殖与呼吸综合征病毒活性
发布时间：2019-08-05 17:41
【摘要】：猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是严重危害养猪业的传染病之一,也是重点防控的疾病之一。人参多糖(ginseng polysaccharides complex,GPS)具有抗病毒及增强免疫的作用。为了寻找有效预防和治疗PPRS的药物,本试验以Marc-145细胞为模型,采用细胞病变抑制试验和MTT法测定细胞活力,观察GPS在体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的作用,并通过改变药物作用方式初步探讨GPS的抗病毒机制。试验分为6组,分别为50,100,200和400 mg/L GPS组、病毒对照组及正常细胞对照组。在GPS对PRRSV感染Marc-145细胞的阻断和抑制作用中,各质量浓度GPS均显著提高感染PRRSV后Marc-145细胞的存活率(P0.05),GPS处理组Marc-145细胞中的PRRSV量均显著低于病毒对照组(P0.05)。而且,GPS可以促进Marc-145细胞中IL-6和IFN-γ的mRNA表达,也能增强细胞上清中IL-6和IFN-γ的活性。本试验研究表明GPS在体外可有效阻断或抑制PRRSV对Marc-145细胞的感染,提示GPS可作为预防和治疗PRRS的候选药物。
【图文】：
图４ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ阻断作用中Ｍａｒｃ－１４５细胞上清液ＩＬ－６和ＩＦＮ－γ抗体检测２．３ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ的抑制作用ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ抑制作用中，表３结果表明各质量浓度ＧＰＳ均能显著提高感染ＰＲＲＳＶ后的Ｍａｒｃ－１４５细胞存活率（Ｐ＜０．０５）。与病毒对照中大量细胞发生病变相比，多糖处理组中病变的细胞数量少，尤其是在高浓度多糖处理组中Ｍａｒｃ－１４５细胞生长状况与正常细胞对照组差异不明显（图５）。ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ感染Ｍａｒｃ－１４５细胞的抑制作用中，ＰＲＲＳＶ的荧光定量结果见图６。ＧＰＳ能抑制ＰＲＲＳＶ感染的Ｍａｒｃ－１４５细胞中病毒的增殖过程，多糖的质量浓度越高，抑制作用越强。２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖处理组细胞中ＰＲＲＳＶ的数量显著低于病毒对照组（Ｐ＜０．０５），５０和１００ｍｇ／ＬＧＰＳ组细胞中ＰＲＲＳＶ的数量与病毒对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。不同处理组Ｍａｒｃ－１４５细胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表达水平见图７Ａ，随着多糖质量浓度提高，细胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表达水平逐渐提高，其中１００，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖处理组细胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表达水平显著高于病毒对照组（Ｐ＜０．０５），５０ｍｇ／Ｌ多糖组细胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表达水平与病毒对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。Ｍａｒｃ－１４５细胞中ＩＦＮ－γ的ｍＲＮＡ表达水平见图７Ｂ。ＧＰＳ能提高Ｍａｒｃ－１４５细胞中ＩＦＮ－γ的
图６ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ的抑制作用中被感染细胞的病毒定量图７ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ抑制作用中Ｍａｒｃ－１４５细胞ＩＬ－６和ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达水平ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ的抑制过程中，Ｍａｒｃ－１４５细胞上清中ＩＬ－６的质量浓度变化见图８Ａ。ＧＰＳ能提高细胞上清中ＩＬ－６的质量浓度，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖处理组的细胞上清中ＩＬ－６的质量浓度水平显著高于病毒对照组（Ｐ＜０．０５），５０和１００ｍｇ／Ｌ多糖组细胞上清中ＩＬ－６的水平与病毒对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ感染Ｍａｒｃ－１４５细胞的抑制作用过程中，细胞上清的ＩＦＮ－γ的质量浓度变化水平见图８Ｂ。随着ＧＰＳ质量浓度的升高，，各多糖处理组细胞上清的ＩＦＮ－γ质量浓度水平也升高，１００，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖组细胞上清中ＩＦＮ－γ的质量浓度水平显著高于病毒对照组（Ｐ＜０．０５），５０ｍｇ／Ｌ多糖组细胞上清中ＩＦＮ－γ的质量浓度水平与病毒对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。图８ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ抑制作用中Ｍａｒｃ－１４５细胞上清液ＩＬ－６和ＩＦＮ－γ抗体检测３讨论ＰＲＲＳＶ属于动脉炎病毒科，猪感染该病毒后的临床表现为母猪繁殖障碍，断奶仔猪罹患肺炎，生长缓慢，死亡率高［１６］。时至今日，ＰＲＲＳ已在世界范围内蔓延，呈现出地方性发病特征，给养猪业带来了巨大的经济损失。２００６年６月我国暴发的ＰＲＲＳ被鉴定为由高致病性ＰＲＲＳＶ引起的［１７］
【作者单位】： 华南农业大学动物科学学院国家生猪种业工程技术研究中心;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31472163) 农业部转基因重点专项资助项目(2014ZX08009-048B) 广东省科技计划资助项目(S2013020012766) 广东省团队资助项目(2011A020102009)
【分类号】：S852.651
本文编号：2523246
【图文】：
图４ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ阻断作用中Ｍａｒｃ－１４５细胞上清液ＩＬ－６和ＩＦＮ－γ抗体检测２．３ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ的抑制作用ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ抑制作用中，表３结果表明各质量浓度ＧＰＳ均能显著提高感染ＰＲＲＳＶ后的Ｍａｒｃ－１４５细胞存活率（Ｐ＜０．０５）。与病毒对照中大量细胞发生病变相比，多糖处理组中病变的细胞数量少，尤其是在高浓度多糖处理组中Ｍａｒｃ－１４５细胞生长状况与正常细胞对照组差异不明显（图５）。ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ感染Ｍａｒｃ－１４５细胞的抑制作用中，ＰＲＲＳＶ的荧光定量结果见图６。ＧＰＳ能抑制ＰＲＲＳＶ感染的Ｍａｒｃ－１４５细胞中病毒的增殖过程，多糖的质量浓度越高，抑制作用越强。２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖处理组细胞中ＰＲＲＳＶ的数量显著低于病毒对照组（Ｐ＜０．０５），５０和１００ｍｇ／ＬＧＰＳ组细胞中ＰＲＲＳＶ的数量与病毒对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。不同处理组Ｍａｒｃ－１４５细胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表达水平见图７Ａ，随着多糖质量浓度提高，细胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表达水平逐渐提高，其中１００，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖处理组细胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表达水平显著高于病毒对照组（Ｐ＜０．０５），５０ｍｇ／Ｌ多糖组细胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表达水平与病毒对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。Ｍａｒｃ－１４５细胞中ＩＦＮ－γ的ｍＲＮＡ表达水平见图７Ｂ。ＧＰＳ能提高Ｍａｒｃ－１４５细胞中ＩＦＮ－γ的
图６ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ的抑制作用中被感染细胞的病毒定量图７ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ抑制作用中Ｍａｒｃ－１４５细胞ＩＬ－６和ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达水平ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ的抑制过程中，Ｍａｒｃ－１４５细胞上清中ＩＬ－６的质量浓度变化见图８Ａ。ＧＰＳ能提高细胞上清中ＩＬ－６的质量浓度，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖处理组的细胞上清中ＩＬ－６的质量浓度水平显著高于病毒对照组（Ｐ＜０．０５），５０和１００ｍｇ／Ｌ多糖组细胞上清中ＩＬ－６的水平与病毒对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ感染Ｍａｒｃ－１４５细胞的抑制作用过程中，细胞上清的ＩＦＮ－γ的质量浓度变化水平见图８Ｂ。随着ＧＰＳ质量浓度的升高，，各多糖处理组细胞上清的ＩＦＮ－γ质量浓度水平也升高，１００，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖组细胞上清中ＩＦＮ－γ的质量浓度水平显著高于病毒对照组（Ｐ＜０．０５），５０ｍｇ／Ｌ多糖组细胞上清中ＩＦＮ－γ的质量浓度水平与病毒对照组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。图８ＧＰＳ对ＰＲＲＳＶ抑制作用中Ｍａｒｃ－１４５细胞上清液ＩＬ－６和ＩＦＮ－γ抗体检测３讨论ＰＲＲＳＶ属于动脉炎病毒科，猪感染该病毒后的临床表现为母猪繁殖障碍，断奶仔猪罹患肺炎，生长缓慢，死亡率高［１６］。时至今日，ＰＲＲＳ已在世界范围内蔓延，呈现出地方性发病特征，给养猪业带来了巨大的经济损失。２００６年６月我国暴发的ＰＲＲＳ被鉴定为由高致病性ＰＲＲＳＶ引起的［１７］
【作者单位】： 华南农业大学动物科学学院国家生猪种业工程技术研究中心;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31472163) 农业部转基因重点专项资助项目(2014ZX08009-048B) 广东省科技计划资助项目(S2013020012766) 广东省团队资助项目(2011A020102009)
【分类号】：S852.651
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3 ;[J];;年期
本文编号：2523246
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