心包积液-肝坏死综合征病原的分离鉴定

发布时间：2019-09-03 07:17

【摘要】：为了确诊山东省某些鸡场送检的疑似心包积液综合征病例,取病死鸡肝脏进行研磨,经鸡胚绒毛膜尿囊腔途径接种10日龄SPF鸡胚,成功获得1株病毒,并进行了鸡胚病变特征观察、PCR检测、基因测序、BLAST分析及动物回归试验。结果表明:成功分离出的1株病毒为鸡心包积液-肝坏死综合征病毒;经基因序列测定表明该病毒是禽腺病毒Ⅰ亚群C种血清型4型(FAV-4)。
【图文】：

基因进化,病毒,禽腺病毒

1试验鸡接种病毒后死亡情况只组别接种病毒后鸡只死亡数量1d2d3d4d5d6d7d8d皮下注射组00352000口服组00000012对照组000000003．3PCＲ检测结果提取SPF鸡胚尿囊液的DNA，经PCＲ鉴定后电泳检测，结果显示出特异性的目的条带，片段大小为1500bp，见图1。M．DL－2000Marker;1．阴性对照;2～7．来自不同鸡场的病料。图1鸡胚接毒后尿囊液PCＲ检测结果3．4序列比对和分析结果PCＲ测序结果与Ⅰ群禽腺病毒(FAV)、Ⅱ群禽腺病毒即火鸡出血性肠炎病毒(HEV)、Ⅲ群禽腺病毒即减蛋综合征病毒(EDSV)的基因序列进行对比(见图2)。结果显示来自山东不同地区的疑似心包积液－肝坏死综合征病鸡分离的病毒(分别命名为SD1508－1、SD1508－2、SD1508－3、SD1508－4)基因序列是完全一样的，进化树结果显示分离到的病毒属于Ⅰ群禽腺病毒。说明山东省正在流行的心包积液综合征的病原是一样的，这为山东省该病的有效防控防治提供了依据。4讨论4．1病毒的种属关系本试验分离的鸡心包积液－肝坏死综合征病毒图2分离病毒与参考毒株基因进化树属于腺病毒科禽腺病毒属(Ⅰ亚群腺病毒)禽腺病毒C种血清型4型(FAV－4)。由基因序列比较发病鸡的病理变化、试验鸡只攻毒后的病理变化特征，说明引起病鸡发生心包积液的病毒是禽腺病毒C种血清型4型。这与相关报道［1－3］只有禽腺病毒4型引起心包积液的症状的结论一致。4．2心包积液－肝坏死综合征病毒能够单独引起鸡只发病通过尿囊液接种10日龄肉鸡进行动物回归试验，表明此病毒单独感染能引起鸡只的发病，且症状与临床发病鸡症状相似，有典型的心包积液症状。这与相关文献报道的此病毒是一种条件性致病病毒的说法不一致。当然任何疾病的发生都受外界条件的影响，如其他病毒、细菌等病原微生物感?

尿囊液,鸡胚,检测结果,禽腺病毒

液后，，皮下注射组3d时出现死亡，5d已全部死亡;口服组7d死亡1只，8d死亡2只;空白对照组鸡只正常，无死亡(见表1)。对攻毒组死亡鸡只和发病鸡进行剖检，都可见心包积液症状，但是试验鸡心包积液液体量不如临床发病鸡多。其他临床症状和剖检症状与临床发病鸡相似。表1试验鸡接种病毒后死亡情况只组别接种病毒后鸡只死亡数量1d2d3d4d5d6d7d8d皮下注射组00352000口服组00000012对照组000000003．3PCＲ检测结果提取SPF鸡胚尿囊液的DNA，经PCＲ鉴定后电泳检测，结果显示出特异性的目的条带，片段大小为1500bp，见图1。M．DL－2000Marker;1．阴性对照;2～7．来自不同鸡场的病料。图1鸡胚接毒后尿囊液PCＲ检测结果3．4序列比对和分析结果PCＲ测序结果与Ⅰ群禽腺病毒(FAV)、Ⅱ群禽腺病毒即火鸡出血性肠炎病毒(HEV)、Ⅲ群禽腺病毒即减蛋综合征病毒(EDSV)的基因序列进行对比(见图2)。结果显示来自山东不同地区的疑似心包积液－肝坏死综合征病鸡分离的病毒(分别命名为SD1508－1、SD1508－2、SD1508－3、SD1508－4)基因序列是完全一样的，进化树结果显示分离到的病毒属于Ⅰ群禽腺病毒。说明山东省正在流行的心包积液综合征的病原是一样的，这为山东省该病的有效防控防治提供了依据。4讨论4．1病毒的种属关系本试验分离的鸡心包积液－肝坏死综合征病毒图2分离病毒与参考毒株基因进化树属于腺病毒科禽腺病毒属(Ⅰ亚群腺病毒)禽腺病毒C种血清型4型(FAV－4)。由基因序列比较发病鸡的病理变化、试验鸡只攻毒后的病理变化特征，说明引起病鸡发生心包积液的病毒是禽腺病毒C种血清型4型。这与相关报道［1－3］只有禽腺病毒4型引起心包积液的症状的结论一致。4．2心包积液－肝坏死综合征病毒能够单独引起鸡只发病通过尿囊液
【作者单位】：聊城大学农学院;聊城大学畜禽疫病防制技术研究中心;
【基金】：聊城大学基金项目(318011503)
【分类号】：S858.31

【相似文献】