半胱氨酸、谷氨酰胺对大鼠肠道菌群及抗氧化指标的影响

发布时间：2019-09-07 18:57

【摘要】：肠道菌群是维持动物肠道机能稳定以及正常免疫功能的基础,对宿主的健康具有重要的意义。高脂肪含量日粮能使机体产生过多的自由基,并产生氧化应激,引起血脂异常,肠道菌群紊乱,严重影响着动物机体健康和生产性能。本研究是在体外发酵试验的基础上,在改良GAM基础培养基中添加适量H2O2,建立氧化应激模型,并研究精氨酸(Arginine)、半胱氨酸(Cysteine)和谷氨酰胺(Glutamine)对发酵液中乳酸菌和大肠杆菌含量的影响。通过在大鼠高脂日粮中添加Cys和Gln,研究其对氧化应激条件下肠道主要细菌含量、部分血液和组织抗氧化指标及体脂肪含量的影响,为进一步研究肠道菌群与功能性氨基酸提供理论依据。试验设计分四部分,第一部分为大鼠肠道全菌群体外发酵试验,试验分7组,对照组,及分别在GAM基础培养基中添加0.6%和1.2%的Arg、Cys及Gln的试验组,每组设3个重复,每个重复GAM培养基为25 ml,分别在发酵0、6、12、24 h后,检测其pH、乳酸菌、双歧杆菌、大肠杆菌、丁酸菌含量;第二部分为构建氧化应激模型,试验分6组,分别在GAM基础培养基中添加0.5、1、2、4、5 mM的H2O2,在发酵0 h、6 h、12 h、24 h检测发酵液中乳酸菌、大肠杆菌的数量,确定适宜的H2O2浓度;第三部分为Arg、Cys及Gln对氧化应激模式下发酵液中乳酸菌、大肠杆菌含量影响,试验分8组,每组3个重复,分别为肠道全菌培养基对照组(GAM)、肠道全菌培养基+2 mM过氧化氢即阴性对照组、在阴性对照基础上添加0.6%、1.2%的Arg、Cys及Gln处理组,筛选出影响显著的处理组用于后续试验;第四部分为Cys及Gln对高脂日粮大鼠肠道主要细菌含量和血液及组织中抗氧化指标影响试验,选择条件一致的8-12周龄,体重240-350 g清洁级SD大鼠60只(公、母各半),利用完全随机试验设计分为6组,分别为正常日粮对照组、高脂日粮组、在高脂日粮基础上添加0.6%、1.2%的Cys组和Gln组。结果表明:1.在GAM基础培养基中添加不同浓度的Arg、Cys及Gln,对乳酸菌、双歧杆菌、大肠杆菌、丁酸菌的含量及pH均有不同程度的影响(p0.05);2.构建体外氧化应激模型的H2O2最适宜浓度为2 mM;3.与对照组相比,GAM基础培养基中加入2 mM H2O2后,发酵液中乳酸菌、大肠杆菌含量显著降低(p0.05),添加不同浓度Arg、Cys及Gln后,乳酸菌和大肠杆菌含量均显著高于H2O2组(p0.05),但与GAM对照组的差异不显著(p0.05);4.高脂日粮组的大鼠各段肠道内的乳酸菌、双歧杆菌数量均显著低于正常日粮组(P0.05),而大肠杆菌和丁酸菌含量高于正常日粮组。添加Cys、Gln组可以使大鼠肠道的这四种菌数量恢复到正常水平;5.高脂日粮组大鼠血液、各段肠组织的ROS、SOD、MDA、T-AOC水平显著高于正常组(P0.05),添加Cys和Gln试验组的ROS、SOD、MDA、T-AOC水平显著低于高脂组(P0.05),但与正常组无差异,且添加的浓度越高ROS、SOD、MDA、T-AOC水平降低越明显;6.高脂日粮组大鼠脾脏和派伊尔结中内毒素含量均显著高于正常值(P0.05),添加1.2%Cys组的值显著降低(P0.05),并与正常组内毒素水平相接近;7.高脂日粮组大鼠TG、TC、LDL-C均显著高于正常组(P0.05),引起高脂血症。添加Cys、Gln试验组各项指标显著低于高脂组(P0.05),添加Gln组效果没有Cys组明显。8.高脂日粮添加Cys和Gln组的体脂肪含量显著低于高脂组,与对照组没有差异,以添加Cys组脂肪含量最低。综合研究结果可以看出,在高脂日粮中添加Cys、Gln,可以增加肠道内的乳酸菌、双歧杆菌水平,降低大肠杆菌水平,提高血液和肠组织中ROS、SOD、MDA、T-AOC等抗氧化指标的水平,降低血液TG、TC、LDL-C的水平,减少脾脏和派伊尔结中内毒素含量。达到降低体脂,使所有指标恢复到正常水平,消除氧化应激的目的。
【学位授予单位】：黑龙江八一农垦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S816

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