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稳定表达猪SAMHD1蛋白的MARC-145细胞系构建与鉴定

发布时间:2019-09-07 21:45
【摘要】:SAMHD1作为宿主的天然免疫限制性因子,参与机体的天然免疫调控,在机体抗病毒感染过程中发挥重要的作用。为了建立稳定表达猪SAMHD1的细胞系,本研究将猪SAMHD1全长编码基因克隆至慢病毒载体pWPXL,构建重组质粒pWPXLpSAMHD1。将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,获得重组慢病毒。将该慢病毒感染MARC-145细胞,经嘌呤霉素筛选后,获得表达猪SAMHD1基因的MARC-pSAMHD1细胞系。经检测发现,该细胞系传至10代,仍能稳定表达猪SAMHD1蛋白。该细胞系的建立为猪SAMHD1抗病毒特性和猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机理等研究奠定了坚实的基础。
【作者单位】: 中国农业科学院上海兽医研究所;
【基金】:国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2014CB542700) 国家科技支撑计划课题(2015BAD12B01-1) 国家自然科学基金项目(31502072,31302098) 国家生猪现代产业技术体系建设项目(CARA-36)
【分类号】:S858.28

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1 戈曼;吴星亮;尹鑫;魏萍;王晓钧;;SAMHD1蛋白单克隆抗体的制备及SAMHD1在不同细胞中的表达鉴定[J];中国预防兽医学报;2013年03期



本文编号:2533270

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