复方氟苯尼考溶液剂的研制及药效学研究

发布时间：2019-10-11 23:29

【摘要】：目的:本试验将氟苯尼考与盐酸多西环素以1:2比例制成溶液剂,并通过正交试验确定其中辅料使用量,随后从影响因素试验、体外抑菌及联合药敏试验和急性毒性试验三个方面对所制制剂进行考察,为该制剂的进一步研究提供资料和依据。方法:1.配方优化:依据中国兽药典建立了以高效液相法测定药物含量的分析方法,然后经过前期试验积累选定了配方中的4个辅料作为正交试验因素,每个因素选取3个水平,设计L9(34)正交试验,依据设计配制相关样品,在40℃恒温环境下测定20天前后样品中两种药物的含量变化,使用正交助手分析结果,最终得出辅料的合理配比;2.稳定性试验:建立了以紫外分光光度法测定药物含量的分析方法,依据药典选取高温(60±2℃)、高湿(90±5%)和强光照射(4500±500lx)三个环境因素,将制剂置于其中10天,于第0天、第5天和第10天测定两种药物含量并观察其颜色和澄明度变化,以此考察三个环境因素对本制剂的影响程度;3.体外抑菌及联合药敏试验:使用常量肉汤稀释法及平板培养测定两种药物对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌和无乳链球菌的MIC和MBC,2种药物对以上5种菌的联合作用的测定使用试管棋盘稀释法,换算出对应FIC值并依据判定标准获得联合作用结果;4.急性毒性试验:按照两步法进行预实验,以盐酸多西环素含量为准找出0~100%死亡率的剂量范围,并参考Dn和Dm设置合适的组间剂量比r。正式试验分为6个试验组,按照组间剂量比r倍比稀释药物,口服给药体积为0.8mL,观察给药后7 d内死亡数,计算方法采用改良寇氏法,求出其LD50和95%可信限(FL)。结果:1.配方优化:确定的辅料用量为:水10mL/100mL,NN-二甲基甲酰胺2.5mL/100mL,氯化镁6g/100mL。据此得到如下配方:每100mL制剂含氟苯尼考5g,盐酸多西环素10g,水10mL,聚乙二醇400 30mL,NN-二甲基甲酰胺2.5mL,氯化镁6g,焦亚硫酸钠0.2g,使用丙二醇定容;2.稳定性试验:结果显示,高温条件下制剂颜色变深程度最高,含量变化为0.50%和4.42%;光照条件下制剂颜色存在变深现象,含量变化为0.97%和2.33%;高湿条件下制剂颜色基本无变化,含量变化为0.18%和0.31%;3.体外抑菌及联合药敏试验:结果显示,MIC在8~32μg/mL之间,抑菌效果良好,而MBC除巴氏杆菌外均大于128μg/mL,杀菌效果较差。联合作用中大肠杆菌为无关作用,沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和无乳链球菌为相加作用,巴氏杆菌为协同作用;4.急性毒性试验:通过预实验得到100%致死量Dn为4000mg/kg,0致死量Dm为2000mg/kg,组间剂量比r为1:0.85。计算结果显示制剂LD50为2579.24mg/kg,95%可信限为2274.32~2925.03mg/kg。结论:建立了基于高效液相法和紫外分光光度法的含量检测方法;通过正交试验最终确定了复方氟苯尼考溶液剂的合理辅料用量;稳定性试验显示本制剂对高温和光照敏感,生产储存时应注意;而通过测定氟苯尼考和盐酸多西环素对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌和无乳链球菌的MIC、MBC和FIC值可以看出,两种药物对5种致病菌的抑制效果均十分良好,但杀灭效果较差,两药联合时正向作用明显,可以进行联合使用;依据急性毒性试验的相关步骤确定本制剂的LD50为2579.24mg/kg,95%可信限为2274.32~2925.03mg/kg,属低毒性药物,但制剂粘稠度较高且适口性差,使用时应注意。
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S859.79

【参考文献】