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中哈边境阿拉山口口岸输入性亚洲璃眼蜱的种类鉴定与分析

发布时间:2019-10-12 21:16
【摘要】:对1批从哈萨克斯坦进口羊毛中检获的蜱样品进行种类鉴定。应用16S rDNA基因和COI基因两条DNA条形码技术进行鉴定分析。结果 16S rDNA序列分析显示与新疆亚洲璃眼蜱(KC203351)同源性最接近(99%);COI基因序列分析显示与新疆伊犁亚洲璃眼蜱(KF527440)同源性最接近(99%)。结论:经DNA条形码比对,确定为亚洲璃眼蜱,应加强对外来医学媒介生物防控,严防"外来病"入侵。
【图文】:

电泳图,电泳,亚洲璃眼蜱,新疆尉犁


CAATGATTTTTTAAATTGCTGTGG16SRCCGGTCTGAACTCAGATCAAGT46092/3054/3072/3038COITY-J-1449AATTTACAGTTTATCGCCTC1-N-2312CATACAATAAAGCCTAATA86394/3045/6072/60401.2.3序列分析及分子遗传进化分析将PCR产物送北京六合华大基因科技股份有限公司测序,测序结果与GenBank中进行Blast进行同源性分析,然后使用Mega6.0软件进行遗传进化分析,构建分子系统进化树。2结果2.1PCR扩增结果通过PCR扩增上述23只蜱样本线粒体DNA,产物经1%琼脂糖凝胶电泳分析,均获得特异性很好的PCR产物,与预期目的片段一致(图1)。图1蜱16SrDNA和COIPCR电泳结果M:DNAMarker;左1~3:蜱样本16SrDNAPCR产物;右1~3:蜱样本COIPCR产物2.2DNA条形码技术分析经测序,16SrDNA基因测得21条序列,COI基因测得21条序列。DNA-MAN分析显示,16SRNA和COI基因序列之间存在多样性,16SrDNA可以获得6个不同序列(KU183532-KU183537),COI可以获得17个不同序列(KU364317-KU364334)。经Blast分析,所有蜱样本均与亚洲璃眼蜱同源性最高。其中,16SrDNA序列显示与新疆亚洲璃眼蜱(KC203351)同源性最接近(99%);COI基因序列显示与新疆尉犁亚洲璃眼蜱(KF527440)同源性最接近(99%)。从分子系统发育树最大似然分析可知,16SrDNA基因序列与亚洲璃眼蜱(KC203351,新疆)(KP400549,新疆阿拉山口)(KF527439,新疆尉犁)(JX051092,内蒙古)聚为一支,COI基因序列与亚洲璃眼蜱(KF527440,新疆尉犁)(JQ737073,甘肃)(JQ737070,新疆)(JX051141,内蒙古)(KF583578,新疆)聚为一支。3讨论随着分子生物学的发展,蜱的分子分类学鉴定开始应用并发展起来[4-5]在蜱类物种鉴定和系统研究中起了非常重要的作,用。16SrDNA是动物线粒体较保守的基因,,进化速率

电泳图,电泳,亚洲璃眼蜱,新疆尉犁


CAATGATTTTTTAAATTGCTGTGG16SRCCGGTCTGAACTCAGATCAAGT46092/3054/3072/3038COITY-J-1449AATTTACAGTTTATCGCCTC1-N-2312CATACAATAAAGCCTAATA86394/3045/6072/60401.2.3序列分析及分子遗传进化分析将PCR产物送北京六合华大基因科技股份有限公司测序,测序结果与GenBank中进行Blast进行同源性分析,然后使用Mega6.0软件进行遗传进化分析,构建分子系统进化树。2结果2.1PCR扩增结果通过PCR扩增上述23只蜱样本线粒体DNA,产物经1%琼脂糖凝胶电泳分析,均获得特异性很好的PCR产物,与预期目的片段一致(图1)。图1蜱16SrDNA和COIPCR电泳结果M:DNAMarker;左1~3:蜱样本16SrDNAPCR产物;右1~3:蜱样本COIPCR产物2.2DNA条形码技术分析经测序,16SrDNA基因测得21条序列,COI基因测得21条序列。DNA-MAN分析显示,16SRNA和COI基因序列之间存在多样性,16SrDNA可以获得6个不同序列(KU183532-KU183537),COI可以获得17个不同序列(KU364317-KU364334)。经Blast分析,所有蜱样本均与亚洲璃眼蜱同源性最高。其中,16SrDNA序列显示与新疆亚洲璃眼蜱(KC203351)同源性最接近(99%);COI基因序列显示与新疆尉犁亚洲璃眼蜱(KF527440)同源性最接近(99%)。从分子系统发育树最大似然分析可知,16SrDNA基因序列与亚洲璃眼蜱(KC203351,新疆)(KP400549,新疆阿拉山口)(KF527439,新疆尉犁)(JX051092,内蒙古)聚为一支,COI基因序列与亚洲璃眼蜱(KF527440,新疆尉犁)(JQ737073,甘肃)(JQ737070,新疆)(JX051141,内蒙古)(KF583578,新疆)聚为一支。3讨论随着分子生物学的发展,蜱的分子分类学鉴定开始应用并发展起来[4-5]在蜱类物种鉴定和系统研究中起了非常重要的作,用。16SrDNA是动物线粒体较保守的基因,进化速率
【作者单位】: 新疆出入境检验检疫局;石河子大学动物科技学院;阿拉山口出入境检验检疫局;石河子大学医学院;新疆农业大学动物医学学院;
【基金】:新疆维吾尔自治区自然科学基金(201442137-1) 国家质检总局科技计划项目(2014IK239) 公益性行业(农业)科研专项(201103008)
【分类号】:S852.746

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4 郭凤t

本文编号:2548273


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