鸭瘟强毒人工感染雏鸭的显微和超微病理学变化

发布时间：2019-10-14 14:03

【摘要】：为了解鸭瘟病毒(DPV)人工感染雏鸭后的组织器官病变规律、感染后病毒分布情况及细胞超微结构变化,试验以DPV GZ强毒株人工感染90羽15日龄健康雏鸭,分别在感染后3、6、10、18、30、48、72、96、108 h剖杀,采用PCR技术进行病原鉴定,并通过光学显微镜和透射电镜进行病理组织显微和超微结构观察。结果显示,人工感染3 h后即可通过PCR技术检测出DPV核酸;透射电镜观察表明感染后10 h可在脾脏中首先观察到少量的病毒,30 h后胸腺开始发现病毒,病毒的数量随感染时间增加逐渐增加;感染18 h后,中枢免疫器官胸腺表现为淋巴细胞数量降低,组织间隙增大;脾脏组织病变严重,其余器官组织结构均出现程度较轻的组织损伤;感染后30 h,中枢免疫器官的淋巴细胞极度减少,器官组织结构模糊不清,出血较为严重;一些器官则出现细胞肿胀,肠道等器官组织也有细胞变性、出血等病理变化;在死亡鸭的肝脏、脾脏、十二指肠、胸腺发现数量极多的病毒。对照组鸭组织中未发现病理变化。这些研究结果可以为鸭瘟病毒的致病机制研究和鸭瘟的病理学诊断提供试验依据。
【图文】：

銄厍焕吖窍掠谢粕鄦倭可釬鑫铮嗤糠中叵儆猩⒃诘男?出血点。感染后30h胸腺皆有出血点变化，肝脏和脾脏出现少量大小不一的白色坏死灶，脑部轻度充血。感染后48h肝脏坏死灶周边伴随有环状出血带，脾脏出现大量坏死点，脑部充血程度加重。感染后72h腹膜水肿，有大量浓性黄色渗出物与脏器相粘连，体内各器官出现肿大充血出血。感染后96～108h雏鸭死亡，立即解剖的雏鸭亦呈现以上大体病理变化，且程度有所加重:心冠状脂肪、心内膜有出血点(图1);肝脏遍布大小不一的出血块和白色坏死灶，胆囊肿大(图2);肺脏出血，气管充血出血(图3);肾脏肿大，有大量出血斑(图4);脑部肿大充血出血(图5);回肠、结肠有环状出血带，肠黏膜脱落，有溃疡突出于肠上皮表面，直肠、盲肠皆有出血点(图6);脾脏肿大，周边可见白色坏死点;胸腺充血出血。2．2利用PCＲ法检测病毒采集感染后雏鸭的不同组织提取DNA样本，应用PCＲ技术进行检测。结果显示感染3h后即可在肝、脾、脑、胸腺、肾和肺几种器官中检出DPV核酸;感染10h后还可在十二指肠、盲肠、心肌和胸肌等器官中检测出病毒核酸;而空白对照组鸭各个受检样品在不同时段上均呈阴性反应(图7)。2．3组织学病理变化2．3．1心脏接种后18h，部分心肌纤维出现轻度肿胀，少量炎性细胞浸润。接种后48h，心肌纤维出现胞核、肌浆深染，有部分心肌纤维溶解断裂(图8)。接种后72h，肌纤维出现脂肪变性和空泡变性，间质明显充血、出血，血管内皮受损。接种后108h，炎性细胞浸润，肌纤维间隙增宽、结构紊乱、变性、断裂、着色不均(图9)。2．3．2肝脏接种后6h，肝细胞核肿胀变大变圆，少数核淡染或消失而留下核影，肝细胞之间的界限模糊，胞浆嗜伊红性增强，内含有微细颗粒状物。之后时间段肝组织呈现不同程江苏农业科学2017年第45?

出血斑,肾脏

超薄切片机切片，柠檬酸铅－醋酸铀双染，透射电镜观察。2结果与分析2．1临床症状及大体病理变化2．1．1临床症状人工感染后30h内未出现明显临床症状，48h后开始出现临床症状:精神沉郁，不喜动，喜卧，脖子紧缩，不饮水，吃食较少;72h开始出现死亡，病鸭呼吸出现湿罗音，鼻腔分泌少量清亮黏液，精神沉郁不喜动，头搭向身体一侧，部分表现出神经症状呈单脚支撑站立姿势;96h头搭向身体一侧，不食不饮，眼内膜灰白浑浊，瞳孔内有白色针尖状颗粒，鼻腔分泌物黏稠呈脓性，呼吸急促，拉稀粪污染肛门周边羽毛;108h全部死亡。2．1．2大体病理变化感染后18h内解剖病变不明显，剖检仅见胸腔肋骨下有黄色少量渗出物，部分胸腺有散在的小出血点。感染后30h胸腺皆有出血点变化，肝脏和脾脏出现少量大小不一的白色坏死灶，脑部轻度充血。感染后48h肝脏坏死灶周边伴随有环状出血带，脾脏出现大量坏死点，脑部充血程度加重。感染后72h腹膜水肿，有大量浓性黄色渗出物与脏器相粘连，体内各器官出现肿大充血出血。感染后96～108h雏鸭死亡，立即解剖的雏鸭亦呈现以上大体病理变化，且程度有所加重:心冠状脂肪、心内膜有出血点(图1);肝脏遍布大小不一的出血块和白色坏死灶，胆囊肿大(图2);肺脏出血，气管充血出血(图3);肾脏肿大，有大量出血斑(图4);脑部肿大充血出血(图5);回肠、结肠有环状出血带，肠黏膜脱落，有溃疡突出于肠上皮表面，直肠、盲肠皆有出血点(图6);脾脏肿大，周边可见白色坏死点;胸腺充血出血。2．2利用PCＲ法检测病毒采集感染后雏鸭的不同组织提取DNA样本，应用PCＲ技术进行检测。结果显示感染3h后即可在肝、脾、脑、胸腺、肾和肺几种器官中检出DPV核酸;感染10h后还可在十二指肠、盲肠、心肌和胸肌等器官中检测出病毒核酸;而空白对照
【作者单位】：贵州大学生命科学学院;贵州大学农业生物工程重点实验室;贵州大学动物科学学院;
【基金】：国家自然科学基金(编号:31260607、31560703) 贵州省科学技术基金(编号:黔科合J字号[2009]2137号)
【分类号】：S858.32

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