腐植酸钠对大肠杆菌抑制作用机理的研究

发布时间：2019-10-18 14:01

【摘要】：羊大肠杆菌病是中国北方冬春舍饲期间多发的疾病之一,有发病迅速,死亡快的特点,是畜牧生产中需要重点防控的传染病。腐植酸钠作为一种饲料添加剂被广泛用于动物生产中,以提高动物生产性能和预防疾病。本试验主要研究腐植酸钠对分离于羊肠道中的4株有毒大肠杆菌的抑制作用并探讨其抑制作用机理。试验结果及结论如下：1.通过荧光分光光度计和流式细胞仪对腐植酸钠处理后大肠杆菌进行PI荧光检测。结果显示,对不同株大肠杆菌而言,虽对腐植酸钠耐受能力有所不同,但随着腐植酸钠浓度的增加(1%-5%),大肠杆菌细胞相对通透率增加,损伤细胞比率增加。当腐植酸钠浓度为5%时,大肠杆菌死亡率可以达到40%左右。试验说明腐植酸钠对大肠杆菌有抑制作用,且随着腐植酸钠浓度的增加抑制作用越明显。2.借助气相色谱仪检测腐植酸钠作用后大肠杆菌细胞膜脂肪酸组成和含量的变化,从细胞膜脂肪酸代谢水平探究腐植酸钠对大肠杆菌的抑制作用机理。结果显示,随着腐植酸钠浓度的增加,大肠杆菌细胞膜脂肪酸不饱和程度降低,细胞膜流动性增加,造成大肠杆菌细胞膜结构改变,细胞脂代谢异常,实现腐植酸钠对大肠杆菌的抑制。3.采用内源荧光分光光度法检测腐植酸钠作用后大肠杆菌菌体蛋白的荧光光谱变化,从细胞膜蛋白结构水平探究腐植酸钠对大肠杆菌的抑制作用机理。结果显示,随着腐植酸钠浓度的增加,大肠杆菌细胞膜蛋白荧光猝灭现象越明显,造成大肠杆菌细胞膜蛋白构象发生改变,细胞膜物质转运出现异常,实现腐植酸钠对大肠杆菌的抑制。4.运用透射电镜观察腐植酸钠对大肠杆菌形态的影响,验证腐植酸钠对大肠杆菌的抑制作用。结果显示,随着腐植酸钠浓度的增加,大肠杆菌细胞发生质壁分离,细胞内容物泄露形成空腔,造成菌体内部的物质合成代谢出现紊乱,直观反映了腐植酸钠抑制大肠杆菌。
【图文】：

细胞分布,腐植酸钠,大肠杆菌,细胞损伤

图４为流式细胞仪检测不同浓度腐植酸钢对大肠巧菌Ｃ２细胞损伤的影喃。如图逡逑所示，未经ＰＩ黄光染色的的空白组大肠杆菌Ｃ２分布的区域为细胞损伤的阴性区域逡逑（坐标［１０，１０］），对照组大肠杆菌Ｃ２细胞分布向右移动，处于细胞损伤阳性区域（横逡逑．坐标［１５５，邋１５口］）细胞比率为１４．２４％，腐植酸钥添加浓度从１％增加至５％，大肠杆逡逑菌Ｃ２细胞分布维续向右移动，且细胞损伤阳性区域细胞比率不断增加，由表２可知，逡逑分别增加至２２．８３？／0、４０．７９％、６７．２７％。添加１％腐植酸钱后，大厥杆菌Ｃ２损伤细胞逡逑比率与对照组细胞正常生长情况下衰亡细胞比率相比，仅增加０．６倍，而添加３％和５％逡逑腐植酸钢使大肠杆菌Ｃ２细胞损伤增加了邋１邋NB６倍和３．巧倍。逡逑

大肠杆菌,腐植酸钠,腐植酸,荧光强度

腐植酸钢添加量为１％时，大损杆茵Ａ１细胞膜表面蜜白的费光图谱与不经逡逑腐植酸钢处理的正常大肠杆菌Ａ１略微降低，在最高点的黄光强度降幅只有２３．１逡逑（２．５％）；腐植酸钢添加量为３％时，大肠杆菌Ａ１细胞膜表面蛋白的巧光图谱继续逡逑下移，在最高点的黄光强度比不经腐植酸钢处理的正常大肠杆菌Ａ１下降１３７．４逡逑（１４．６％）；腐植酸钢添加量为５％时，大肠杆菌Ａ１细胞膜表面蚕白的夷光图谱是逡逑所有组中最矮的，，在最高点的英强比不经腐植酸钢处理的正常肠人１
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S855.12

【参考文献】