利用Onapristone研究绵羊子宫内膜组织中孕酮对PGF2α分泌以及COX-2表达的影响

发布时间：2019-10-23 20:32

【摘要】：为了探讨孕酮通过环氧合酶-2(COX-2)/前列腺素2α(PGF2α)信号通路调节家畜黄体溶解的作用机制,本研究采用孕酮受体的特异抑制剂Onapristone处理体外培养的绵羊子宫内膜组织,检测分泌到培养液中的PGF2α浓度以及子宫内膜中PGF2α合成过程中关键酶基因COX-2的mRNA和蛋白质表达水平。结果显示,Onapristone添加到子宫内膜组织培养液中后,内膜组织合成分泌的PGF2α浓度明显下降,且抑制了COX-2 mRNA和蛋白质表达水平,高剂量的Onapristone(20.0μmol/L)处理72 h后COX-2的蛋白表达水平仅为对照组的23%。表明,孕酮通过其受体介导的COX-2/PGF2α信号通路调节家畜的黄体溶解过程,且COX-2对于PGF2α的合成起到重要的作用。
【图文】：

*表示相应处理组与空白对照组差异达到显著水平(P＜0.05)。图1Onapristone处理对绵羊子宫内膜合成PGF2α的影响Fig．1EffectofonapristoneontheproductionofPGF2αino-vineendometriumexplants外培养过程中添加孕酮受体抑制剂Onapristone后，与对照组中正常培养的子宫内膜组织相比，，0.2μmol/L、2.0μmol/L、20.0μmol/L的Onapristone处理组中COX-2的mＲNA表达量在培养24h、48h以及72h时均有着不同程度的下降，与对照组差异极显著(P＜0.01)。＊＊表示相应处理组与空白对照组差异达到极显著水平(P＜0.01)。图2Onapristone处理对绵羊子宫内膜COX-2mＲNA表达的影响Fig．2EffectofonapristoneonthemＲNAexpressionofCOX-2inovineendometriumexplants2．3Onapristone对绵羊子宫内膜组织中COX-2的蛋白质表达水平的影响利用Westernblot检测了添加0.2μmol/L、2.0μmol/L、20.0μmol/L的Onapristone到绵羊子宫内膜组织块体外培养液中PGF2α合成过程中关键酶COX-2的蛋白质表达水平(图3、图4)。COX-2蛋白表达量经内参蛋白Histone3表达量校正后的结果显示，不同剂量的Onapristone对COX-2在子宫内膜中的蛋白质表达起到不同程度的抑制作用(图4)。尤其是在添加Onapristone的72h后，高剂量Ona-pristone组(20.0μmol/L)子宫内膜组织中COX-2的蛋白质表达量明显的低于对照组正常培养的子宫内膜组织中COX-2的蛋白质表达水平，仅为对照组蛋白水平的23%。24h、48h、72h为Onapristone处理时间;0．2μmol/L、2．0μmol/L、20．0μmol/L为Onapristone处理浓度;Histone为内参蛋白。图3不同浓度Onapristone处理绵羊子宫内膜组织后COX-2蛋白Westernblot结果Fig．3WesternblotanalysisofCOX-2proteininovineendo-metriumexplantsafteronapristonet

*表示相应处理组与空白对照组差异达到显著水平(P＜0.05)。图1Onapristone处理对绵羊子宫内膜合成PGF2α的影响Fig．1EffectofonapristoneontheproductionofPGF2αino-vineendometriumexplants外培养过程中添加孕酮受体抑制剂Onapristone后，与对照组中正常培养的子宫内膜组织相比，0.2μmol/L、2.0μmol/L、20.0μmol/L的Onapristone处理组中COX-2的mＲNA表达量在培养24h、48h以及72h时均有着不同程度的下降，与对照组差异极显著(P＜0.01)。＊＊表示相应处理组与空白对照组差异达到极显著水平(P＜0.01)。图2Onapristone处理对绵羊子宫内膜COX-2mＲNA表达的影响Fig．2EffectofonapristoneonthemＲNAexpressionofCOX-2inovineendometriumexplants2．3Onapristone对绵羊子宫内膜组织中COX-2的蛋白质表达水平的影响利用Westernblot检测了添加0.2μmol/L、2.0μmol/L、20.0μmol/L的Onapristone到绵羊子宫内膜组织块体外培养液中PGF2α合成过程中关键酶COX-2的蛋白质表达水平(图3、图4)。COX-2蛋白表达量经内参蛋白Histone3表达量校正后的结果显示，不同剂量的Onapristone对COX-2在子宫内膜中的蛋白质表达起到不同程度的抑制作用(图4)。尤其是在添加Onapristone的72h后，高剂量Ona-pristone组(20.0μmol/L)子宫内膜组织中COX-2的蛋白质表达量明显的低于对照组正常培养的子宫内膜组织中COX-2的蛋白质表达水平，仅为对照组蛋白水平的23%。24h、48h、72h为Onapristone处理时间;0．2μmol/L、2．0μmol/L、20．0μmol/L为Onapristone处理浓度;Histone为内参蛋白。图3不同浓度Onapristone处理绵羊子宫内膜组织后COX-2蛋白Westernblot结果Fig．3WesternblotanalysisofCOX-2proteininovineendo-metriumexplantsafteronapristonet
【作者单位】： 江苏省农业科学院畜牧研究所;诺丁汉大学生物学院;
【基金】：国家自然科学基金项目(31601943)
【分类号】：S826

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本文编号：2552239