SE对TLR4信号通路调节雏鸡空回肠pIgR表达的影响

发布时间：2019-11-08 18:55

【摘要】：本试验以1日龄海兰褐雏鸡空肠和回肠组织为研究对象,利用RT-PCR的方法检测雏鸡空肠、回肠、十二指肠和盲肠组织中p Ig R m RNA的表达量;利用分子克隆技术,在体外克隆兔抗雏鸡p Ig R多克隆抗体;通过口服肠炎沙门氏菌(Salmonella Enteritidis,SE)的方法感染雏鸡,于感染后的1d、3d、7d和14d,利用荧光定量PCR的方法检测雏鸡空肠和回肠组织中TLR4信号通路中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p IgR m RNA的表达量;Western Blot检测雏鸡空肠和回肠组织中p Ig R蛋白表达水平;旨在探讨SE对TLR4信号通路调节雏鸡p Ig R的影响,结果表明:(1)利用原核表达载体融合雏鸡p IgR蛋白,免疫雄性新西兰大白兔,成功制备了兔抗雏鸡p Ig R多克隆抗体。(2)SE感染雏鸡空肠组织,实验组TLR4、TRAF6、My D88、NF-κB和p Ig R mRNA表达在1d开始上调,且NF-κB m RNA表达明显升高(P0.05);到第3d时,将实验组和对照组对比发现,TLR4 m RNA表达量明显上调(P0.05),p Ig R m RNA表达量明显提高(P0.01);随后基因表达开始下调,至第14d,实验组和对照组中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p Ig R mRNA表达量差异不显著。结果表明,雏鸡感染SE后,TLR4信号通路被激活,且空肠组织中p IgR mRNA的表达量升高。(3)SE感染雏鸡回肠组织,实验组TLR4、TRAF6、My D88、NF-κB和p Ig R mRNA表达量在1d开始上调,且NF-?B m RNA表达量升高(P0.05);到第3d时,将实验组和对照组对比发现,TLR4、My D88和p Ig R m RNA表达量极显著升高(P0.01),而TRAF6 mRNA表达量明显提高(P0.05);随后基因表达量开始下调,至14d时,实验组和对照组中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p Ig R m RNA表达量差异不显著。结果表明,雏鸡感染SE后,TLR4信号通路被激活,且回肠组织中p Ig R m RNA的表达量升高。(4)SE感染雏鸡空肠和回肠组织,实验组和对照组相比p Ig R的蛋白水平明显上升(P0.01),结果表明,雏鸡感染SE后,上调空肠和回肠组织中p Ig R的蛋白水平。(5)SE激活空肠和回肠黏膜细胞表面的TLR4信号通路上调p Ig R的表达,进而增强雏鸡的肠黏膜免疫。
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S831

【参考文献】