安徽部分地区APEC分离鉴定及其致病性与耐药性分析

发布时间：2020-03-29 03:51

【摘要】：禽致病性大肠杆菌(APEC)是危害养禽业发展的主要细菌性病原之一。有研究显示,APEC是人肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的毒力基因和耐药基因的贮存库,被其污染的禽类食品可能是导致ExPEC跨宿主传播的主要来源,因此研究分析APEC的致病性与耐药性是目前研究热点。本研究围绕该热点,通过对安徽部分地区APEC分离鉴定及其致病性与耐药性分析,为安徽省养禽业的APEC流行情况及其在未来的流行病学的研究提供数据参考,为临床防治和提高公共卫生安全提供新的研究思路。具体研究内容如下:1.安徽部分地区APEC的分离鉴定本研究通过培养分离、生化鉴定及16S rRNA等方法,从具有大肠杆菌病临床症状的病例中,共鉴定出72株禽源大肠杆菌,其中14株从粪便和肠道中分离,58株从肠外脏器组织分离。2.APEC分离株的致病性分析本研究对72株禽源大肠杆菌分离株进行种系发生分型、致病性实验、毒力基因的检测等进行致病性分析,并通过PCR方法对分离株中O1、O2和O78血清型进行调查。种系发生分型、血清型调查和致病性实验结果表明,安徽部分地区分离株以B2群为主要优势进化群,72株分离株均为APEC,58株属于中高致病性菌株,共有23株APEC是O1、O2和O78血清型;毒力基因PCR结果显示,分离株携带数量不一的毒力基因,其中mat、fimC、ibeB、yijP、ompA、iss、iucD、iroN、chuA基因阳性率均超过50%,在肠外APEC和肠内APEC分离株中aatA、iucD、cva/cvi基因分布存在明显差异,其它毒力相关基因检出率无显著差异。3.APEC分离株的耐药性分析本研究分别对72株APEC进行药物敏感性、耐药基因等耐药性分析,结果表明:72株APEC对氨苄西林全耐药,对多粘菌素B和氟甲喹较为敏感,分别达100%和98.6%,其中表型多重耐药中3-7重耐药率占68.1%(49/71);耐药基因PCR结果显示,肠内APEC和肠外APEC的耐药基因检出率基本一致,多粘菌素、氯霉素和喹诺酮类与表型耐药基本符合。
【图文】：

图 1- 1 菌株分离结果图Figure 1-1 Strains separation results2.1.2 APEC 分离株鉴定结果（镜检、生理生化实验结果）经革兰氏染色镜检、三糖铁斜面培养和 15 种生化实验鉴定结果为：革兰氏染色为红色杆状；可使葡萄糖产酸产气，，分解乳糖、麦芽糖等；吲哚、MR 阳性，VP阴性，不产生 H2S，枸橼酸盐阴性；在三糖铁斜面产酸产气，这些基本生化特性都符合大肠杆菌的特征，鉴定出 72 株禽致病性大肠杆菌如下图 1-2 和表 2-1。麦康凯 伊红美蓝 普通培养基

2 结果与分析2.1 安徽部分地区禽致病性大肠杆菌的分离鉴定2.1.1 APEC 安徽分离株分离结果观察结果为：麦康凯培养基：圆形、表面湿润光滑、亮红色的菌落；伊红美蓝琼脂：有金属光泽、紫黑色的菌落；LB 培养基 ：圆形，湿润、半透明光滑、凸起、灰白色的菌落，如图 1-1。
【学位授予单位】：安徽农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S852.612

【参考文献】

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本文编号：2605396