【摘要】：肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是近几年来发现的骨骼肌生长的负调控因子,其活性的丧失,会引起动物肌肉的过度发育,肌纤维直径变大或肌纤维数增加,表现为动物的“双肌”性状。在小鼠、狗、牛和人类中MSTN突变的个体均表现出骨骼肌过度发育的表型。本研究对基因组定点编辑技术与体细胞克隆技术结合获得的MSTN基因单侧突变(MSTN+/-)和双侧突变(MSTN-/-)的猪进行生理生化指标等检测,为基因改良瘦肉型品种猪的培育提供基础性数据。研究内容及结果主要包括以下几个方面:为了鉴定在基因敲除猪中MSTN基因表达及观察其表达水平的变化,采用逆转录(ReverseTranscriptionPCR,RT-PCR)的方法,检测 MSTN,卵泡抑素(Follistatin),核心蛋白多糖(Decorin),以及可溶性受体ActRIIB在背最长肌与股二头肌中的表达情况。MSTN基因缺失后,Follistatin、Decorin与ActRⅡB在MSTN+/-猪与MSTN-/-猪背最长肌中均有不同程度表达;在MSTN+/-猪的股二头肌中除Follistatin只有少量表达以外,Decorin与ActR IIB均无表达,Follistatin、Decorin与ActRIIB在MSTN-/-猪股二头肌中均无表达。经过对三种猪即野生型WT、MSTN+/-和MSTN--猪的血液检测及分析,发现野生型猪(18.4±0.55)与MSTN+/-猪(12.25±0.32)、MSTN-/-猪白细胞总数(12±0.15)比较各有显著性差异(P0.05);但是MSTN基因敲除猪之间比较白细胞总数无显著性差异(P0.05);野生型猪(22±1.95)、MSTN+/-猪(15.9±0.92)与MSTN--猪中性粒细胞百分比(18.7±1.72)比较结果表明三者互相均有显著性差异(P0.05)。采取三种猪的尿液进行检测后发现三组猪的尿胆原含量、潜血含量、蛋白质含量与白细胞含量均显示为可忽略的疑似阳性反应(“±”号);其余胆红素、酮体、亚硝酸盐、葡萄糖含量均显示为阴性反应,表明数值完全正常,并且尿液pH值均在正常范围内(pH=7.0)。综上所述,虽然在上述指标中部分血液指标在MSTN基因敲除猪与野生型猪之间存在显著的差异,但是所有指标均在健康猪正常范围内。因此初步判定MSTN基因敲除猪与该同种野生型猪的指标均为正常。
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S828
【参考文献】
相关期刊论文 前7条
1 高丽;谌颜;扈廷茂;李光鹏;;肌肉生长抑制素基因在哺乳动物中的最新研究进展[J];生物技术进展;2014年06期
2 ;我校刘忠华教授的“克隆猪”研究项目迈向产业化[J];东北农业大学学报;2011年05期
3 孙加节;张春雷;房兴堂;陈宏;;核心蛋白多糖基因(DCN)的研究进展[J];中国牛业科学;2010年02期
4 陆琳;郭成裕;王国强;;迪庆绵羊生产性能和生理指标测定结果[J];当代畜牧;2008年02期
5 莫毅,郭亚芬,兰干球,窦璋琴,兰虹丞,蒋钦杨,杨秀荣,蒋和生,李柏;广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)cDNA的克隆和序列分析[J];广西农业生物科学;2005年02期
6 王爱德,郭亚芬,李柏,胡传活,魏泓;巴马小型猪血液生理指标[J];上海实验动物科学;2001年02期
7 周虚;世界首例转基因克隆猪在英国诞生[J];中国兽医学报;2001年03期
相关会议论文 前1条
1 苏玉丽;;犬尿液检查的临床评估[A];第十三次全国养犬学术研讨会论文集[C];2009年
相关硕士学位论文 前4条
1 李富强;合作猪血液生理生化及免疫指标的测定和IFN-γ序列分析[D];甘肃农业大学;2013年
2 邱青松;转FSHα/β基因克隆猪分子鉴定及常规生理生化指标测定[D];江西农业大学;2012年
3 陈会兰;克隆猪部分组织病理学及生理生化指标分析[D];上海海洋大学;2012年
4 赵丽华;肌肉生长抑制素基因敲除肉牛的研究[D];内蒙古大学;2011年
，
本文编号：
2607273
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/2607273.html
