牛催乳素信号肽对多中和表位重组猪圆环病毒3衣壳蛋白表达量的提升作用

发布时间：2020-04-29 00:01

【摘要】：本文以猪圆环病毒三型(PCV3)的衣壳蛋白为研究对象,通过生物信息学的手段对其中和表位和逃逸表位进行预测,将其逃逸表位替换为其中的一个中和表位来获得多中和表位的重组PCV3衣壳蛋白,在大肠杆菌表达系统中诱导表达该蛋白。在对这个低表达的重组蛋白改构的期间,我们发现牛催乳素信号肽具有提高多中和表位重组PCV3衣壳蛋白表达量的功能。本研究结果为解决大肠杆菌中重组蛋白的低表达提供了新的思路,同时为制备能在大肠杆菌中大量表达的更高活性的PCV3多表位VLP疫苗抗原奠定了基础。
【图文】：

（1911-1966）[24]。统计发现，妊娠衣壳蛋白的结构约为 1760bp，，典型的 PCV2 基因组V2 相似的环状单链 DNA 基因组，大的反向排列的开放阅读框架（open ，分别编码 296 个氨基酸的复制酶psid, Cap），其中 Cap 蛋白是唯一的在宿主中的特异性免疫反应[8,25]。复制酶蛋白和蝙蝠环状病毒有 55%

PCV3 CP 全长 214 个氨基酸，其氨基酸序列具有高突变性，不同序列之间的相似性都在 95%以上[15]。在自然条件下，60 个 PCV3CP 能够组装成天然病毒颗粒，为二十面体的对称结构。PCV2 CP 的 N 端存在一个核定位信号肽序列（Nuclear localization sequence , NLS），由 41 个保守的氨基酸序列组成，这个区间富含精氨酸，有协助病毒的基因组进入细胞核中的功能[26]。 PCV3 CP 的 N端也存在 NLS 区域，长度为 36 个氨基酸[20]。PCV3 的 NLS 中富含精氨酸，应该也有与 PCV2 CP 的 NLS 相同或相似的作用。1.2.3 猪圆环病毒 3 型的分类PCV3 CP 的突变导致其亚型的产生。对出现在中国的 51 种 PCV3 CP 序列进行统计分析，PCV3CP 的突变点主要出现于以下位置：R2/G，R10/K，R14/K，Y23/F，A24/V，R27/K，I30/V，V48/I，I49/V，A75/S，T77/S，S95/F，F104/Y，R132/C，S137/F，I150/L 和R168/K（图1.2）[20]。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S852.4

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本文编号：2644007