不同发育阶段不同毛色绵羊皮肤中TRPM1表达特性研究
发布时间：2020-04-29 03:46
【摘要】：瞬时受体式基因 1(Transient Receptor Potential Melastatin 1,TPRM1)在完全分化黑色素细胞表型和分化增殖调控中具有重要作用,并且只在正常的黑色素细胞中表达。已有研究表明,黑色素含量的下降与TRPM1的表达减少有关。本试验旨在研究不同发育阶段不同毛色公绵羊皮肤在中TRPM1表达特性,选取0、3、6、12月龄杜泊绵羊(♂)X蒙古羊(早)杂交黑、白公羊为试验对象,提取绵羊皮肤组织总RNA,扩增TRPM1完整CDS区,qRT-PCR检测TRPM1mRNA,免疫组织化学技术对绵羊皮肤中TRPM1定位,Western Blotting技术对TRPM1蛋白进行分析。主要研究结果如下:(1)绵羊TRPM1基因完整CDS区长度为5017bp;由1671个氨基酸组成;TRPM1的二级结构中存在潜在信号肽位点,含有疏水区域和6个跨膜结构,N-糖基化位点可能有9个,存在潜在的磷酸化位点。(2)在0、3、6、12月龄黑、白杂交公羊中皮肤中,TRPM1mRNA均有不同程度的表达,6月龄白色绵羊皮肤中的表达显著高于其他月龄白色绵羊皮肤中的表达量(P0.05)。黑色绵羊皮肤中0月龄TRPM1的表达量显著低于其他月龄(P0.05)。不同发育阶段黑色绵羊皮肤中TRPM1 mRNA的表达量显著高于相同月龄白色绵羊皮肤中的表达量(P0.05)。(3)Western Blotting结果显示TRPM1蛋白在不同发育阶段的黑、白绵羊皮肤中均有表达,但不同月龄的表达具有差异性,进一步验证了 mRNA水平检测的结果。(4)免疫组织化学结果显示,在白色和黑色绵羊皮肤中,TRPM1蛋白定位于毛囊毛干、外根鞘、毛乳头和毛发基质。初步阐明不同发育阶段不同毛色绵羊皮肤在中TRPM1表达特性,初步证实TRPM1基因在绵羊毛色形成中的重要作用,为研究绵羊TRPM1基因在黑色素形成过程中的功能奠定一定的基础。
【图文】：
２邋ＴＲＰＭ蛋白家族概况逡逑哺乳动物ＴＲＰＭ亚科由八个成员组成，它们在５’羟基跨膜域上与ＴＲＰＣ通道共逡逑享２０％的氨基酸叱类似于ＴＲＰＣｓ、ＴＲＰＭ蛋白质有ｃ羟基端跨膜域（图１－２）。这逡逑些蛋白质的总氨基酸长度（１０００－邋２０００）和ｃ羟基末端区域的序列差异很大。基于氨基逡逑酸序列的相似性，这些蛋白质分为ＴＲＰＭ１／３、ＴＲＰＭ４／５和ＴＲＰＭ６／７（图１－３＼ＴＲＰＭ２逡逑和ＴＲＰＭ８不属于任何子集，尽管它们之间的关系最为密切。ＴＲＰＭ２和ＴＲＰＭ６／７是逡逑不同寻常的，它们是通道酶，都具有ｃ端酶域问。逡逑－３－逡逑
肽预测逡逑程序对氨基酸序列进行信号r婪治觯ㄍ迹玻矗＃樱椋纾睿幔欤形恢媒性げ狻＃茫螅悖铮颍邋澹恚幔椋恚酰碇缚赡艿男藕烹闹感藕烹淖槌刹糠值目赡苄裕唬伲螅悖铮颍邋澹恚幔椋恚酰碇刚媸抵福樱螅悖铮颍宓钠骄郑绻樱螅悖铮颍邋澹恚澹幔睿荆埃担蛟げ庾畲螅弥滴保叮畲螅僦滴保叮畲螅又滴保矗幽艿那懈钗坏阍冢保保抵洌裕遥校停莅被嵝蛄兄校裕
本文编号：2644189
【图文】：
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