副猪嗜血杆菌nanH和lsgB基因缺失株的免疫保护力和毒力研究

发布时间：2020-05-03 20:02

【摘要】：副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)是一种定植于猪上呼吸道的革兰氏阴性条件致病菌,猪在免疫力低下或者应激状态下时,该菌可引起格拉瑟氏病(Gl?sser’s disease)。尽管副猪嗜血杆菌毒力因子及致病机理仍不清楚,但病原菌表面唾液酸化是其逃避和抵抗宿主免疫系统重要的机制,而且已有体外实验表明副猪嗜血杆菌的唾液酸酶和唾液酸转移酶与细菌毒力密切相关,所以本论文对副猪嗜血杆菌唾液酸基因缺失株JS0135△nanH和唾液酸转移酶基因缺失株SH0165△lsgB对仔猪的免疫保护效果和致病能力进行了研究,所取的主要研究结果如下。1.JS0135△nanH和SH0165△lsgB对仔猪的免疫保护将JS0135△nanH和SH0165△lsgB通过肌肉途径和腹腔途径免疫仔猪,商业灭活疫苗免疫和PBS免疫作为阳性对照和阴性对照,然后用强毒株SH0165攻毒。实验中检测仔猪血清中副猪嗜血杆菌抗体水平上升的速度,发现JS0135△nanH免疫组仔猪抗体水平上升速度快于SH0165△lsgB免疫组仔猪,SH0165△lsgB免疫组仔猪快于商业灭活疫苗免疫组仔猪;JS0135△nanH免疫组通过腹腔途径免疫的仔猪显著快于通过肌肉途径免疫的仔猪,SH0165△lsgB免疫组仔猪两种免疫途径没有明显差异。仔猪攻毒后综合评价不同免疫组的免疫保护效果,JS0135△nanH优于SH0165△lsgB,SH0165△lsgB优于商业灭活苗。2.野生株和缺失株感染细胞刺激细胞炎性因子将JS0135和JS0135△nanH,SH0165和SH0165△lsgB分别感染3D4/2细胞,4h后检测细胞炎性因子的mRNA表达水平,发现IL-1α、IL-8和TNF-α差异性表达。然后在2h、4h和8h时,检测IL-1α、IL-8和TNF-α的表达情况,结果显示缺失株较野生株刺激细胞产生更高的细胞炎性因子(P≤0.01)。3.野生株和缺失株对仔猪攻毒将JS0135和JS0135△nanH,SH0165和SH0165△lsgB分别对仔猪进行攻毒,通过记录仔猪临床症状、大体病理变化和组织器官分菌,结果表明SH0165△lsgB相对野生株SH0165对仔猪致病力明显下降,JS0135△nanH相对野生株JS0135对仔猪致病力没有明显改变;JS0135△nanH在存活下来的仔猪体内全部被清除。
【图文】：

3.2.1.5 仔猪免疫攻毒前后体温测量图 3-1 仔猪免疫保护实验示意图Fig. 3-1 Schematic diagram of piglets immune protection experiment

.6 仔猪免疫攻毒后临床症状及评分标准图 3-2 仔猪测量体温时间点示意图Fig. 3-2 Schematic diagram of piglts measuring rectal temperature time
【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S852.61

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本文编号：2648045