过表达和干扰表达miR-370对牛OLR1基因表达的影响

发布时间：2020-05-09 05:47

【摘要】：mi RNAs是一种内源性的具有调控作用的非编码RNA,其大小为20~25 nt,本身不具有开放阅读框。miRNA与靶基因3’UTR通过碱基互补配对的方式,降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译,从而调控靶基因的表达。研究表明,miRNA参与生物体内各种各样的调节途径,如发育、细胞增殖和凋亡以及脂肪代谢等。氧化低密度脂蛋白受体1(OLR1)基因与脂肪沉积过程密切相关,已有的研究表明,OLR1基因影响奶牛的乳脂率及肉牛的肉品质性状,并且OLR1基因3’UTR存在bta-miR-370的靶序列互补区,当OLR1基因的3’UTR发生碱基突变时,该miRNA的结合位点消失。为了进一步验证该miRNA是否对牛OLR1基因具有直接的调控作用。本研究通过向牛脂肪细胞中转染miRNA的类似物及阻抑物,分别对牛脂肪细胞中的miR-370进行过表达和干扰表达,24 h后提取细胞总RNA并反转录为cDNA,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,检测OLR1基因的表达量,结果表明:转染miR-370 mimics实验组OLR1基因的表达量比转染mi R-370 mimics control的对照组显著降低(p0.01);而且转染miR-370 inhibitor实验组OLR1基因的表达量比转染miR-370 inhibitor control对照组显著升高(p0.01)。该研究结果提示miR-370对牛OLR1基因表达具有显著的负向调控作用,为进一步阐述OLR1基因对性状的影响机理研究方面提供了理论依据。
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S823

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