高能低蛋白日粮致FLHS蛋鸡的血清代谢组学分析

发布时间：2020-05-13 06:09

【摘要】：为了探讨蛋鸡脂肪肝出血综合征(FLHS)的脂肪代谢变化和寻找血液中生物标志物,本试验选用120日龄海兰褐蛋鸡100羽,随机分成对照组和试验组,每组5个重复,每个重复10羽,其中对照组饲喂基础日粮(2678.99 kcal/kg,粗蛋白15.86%),试验组饲喂高能低蛋白日粮(代谢能3100.00 kcal/kg,粗蛋白12.00%),试验期为100d,分别于第40d和80d采集肝脏样本制作病理组织切片和测定AMPK信号通路中关键蛋白的表达量,采集血液样本进行GC-TOF-MS代谢组学分析。结果如下:1、与对照组相比,解剖发现试验组蛋鸡皮下腹部脂肪增多,肝脏边缘钝圆、质脆且有黄色脂肪沉积;病理组织切片观察试验组肝细胞内存在大小不一的脂肪空泡,细胞核被挤在一侧。2、与对照组相比,试验组肝脏P-AMPKα蛋白表达量显著下降(P0.05或P0.01)。与对照组相比,在40d时ACC和P-ACC蛋白表达量显著上升(P0.05或P0.01),而在80d时P-ACC和P-ACC/ACC蛋白表达量显著下降(P0.05)。3、与对照组相比,血清代谢组学分析表明,试验组40d时差异代谢物中3-羟基丁酸、油酸、异亮氨酸、亚油酸、酮基异己酸、甘露糖、苯乙酸、3-氨基异丁酸、月桂酸、胡椒碱、琥珀酸半醛、十八碳醇和苯邻二酚含量显著下降(P0.05或P0.01),而邻苯二甲酸二辛酯含量显著上升(P0.05);80d时差异代谢物中苏氨酸、柠檬酸、磷酸盐、棕榈油酸、苏糖酸、肉豆蔻酸、尿酸、蔗糖、草酸、马来酰亚胺、衣康酸、丙醇二酸、肌氨酸、雄烯二醇、间苯二酚、丙二酸、二氢香芹醇、2-丁炔-1,4-二醇和茚满醇含量显著下降(P0.05或P0.01),而丝氨酸、谷氨酸和苯基β-D-吡喃葡萄糖苷含量显著上升(P0.05)。结果表明在FLHS的影响下,蛋鸡肝脏中AMPK调控脂肪酸合成的信号通路传导紊乱,造成脂肪酸合成增多,加剧了脂肪的沉积。此外,代谢组学分析发现机体整体脂肪酸代谢和氨基酸代谢紊乱,能量代谢合成增加分解减少,3-羟基丁酸与作为监测脂肪酸代谢重要生物标志物的3-羟基丁酸酯有着密切联系,该物质在FLHS的影响下变化显著,或许也是FLHS潜在的生物标志物。
【图文】：

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图1 AMP调节AMPK的作用模式Fig. 1 Regulation mode of AMP and AMPK可知，AMP结合去磷酸化的AMPK，使其成为AMPKK更佳活，形成R构象的磷酸化AMPK，所以一定程度上R构象的号通路中AMPK被激活后的产物。AMP的作用同时受到高浓P共同调节AMPK的活性。酶（如AMPKK等）激活AMPK主要是以磷酸化的方式进行，均有磷酸化位点，磷酸化位点的不同表明AMPK被激活的途α亚基中Thr-172是上游激酶磷酸化AMPK的主要激活位点[30]制因子LKB1作为AMPK的上游激酶，在AMPK激活循环中，对α亚基进行磷酸化后直接激活AMPK，从而影响肿瘤细胞的助蛋白STRAD和MO25形成异源三聚体，也通过磷酸化的方r172位点激活[32, 33]，与AMPK结合的AMP还通过蛋白质磷酸，Thr172的磷酸化是调节AMPKα激酶活性的主要位点[34, 3信号通路在蛋鸡脂肪肝出血综合征中的作用，选定AMPKα为P-AMPKα（thr172）蛋白表达水平能有效地说明信号通路中

模式图,模式,代谢物,代谢组学

图2 AMPK调节ACC的作用模式Fig. 2 Regulation mode of AMPK and ACC谢组学的概述统的基因组学和蛋白质组学在基因和蛋白方面阐述了生命活动，但随着有研究表明两者并不全面[48, 49]，很多生理活动发生于代谢物层面，而代来调控生命活动[50][51]，因此研究代谢物差异是具有重大意义的。代谢、组织、器官和有机体的集合，是细胞过程的终产物。代谢组学的定生命系统对病理生理刺激或基因修饰的动态多参数代谢反应”[52]。代谢代谢物、小分子中间体和代谢物化学过程进行分析，具体来说，是对特留下来的小分子代谢产物特征的系统研究[53]。代谢组学在疾病诊断、营毒理学等多种领域有着重要的作用。谢组学是一个集组群指标分析、高通量检测和数据处理为一体的系统生旨在实现信息建模与系统整合的目标[54]。其主要的研究对象是小分子<1000），它们在各种代谢路径中起着尤为重要的作用[55]。在食品安全有着新的用处，被用作在动植物的细胞和组织的提取液中检测有毒物质
【学位授予单位】：江西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S831.5

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