钩吻生物碱的提取分离和纯化研究

发布时间：2020-05-13 20:13

【摘要】：目的:本试验对比95%乙醇、酸水、水三种溶剂的提取法对钩吻总生物碱提取率的影响。从中寻找出简便、高效、科学的粗提方法。由于大孔树脂法可以有效的控制生产成本,同时生产周期短等特点,在提取生物碱时可以避免使用一、二类有机溶剂,这是其它方法不具有的,所以进行探究大孔树脂法对钩吻生物碱的纯化条件优化,从而为运用大孔树脂法进行钩吻工业化纯化提供理论依据。方法:本研究以90%乙醇和0.5%硫酸为溶剂和水进行钩吻生物碱的提取,比较不同溶剂提取的钩吻粗提物得率不同。对比为以后对钩吻进行工业生产提供参考依据。为了进一步提高钩吻的利用率。对钩吻的粗提物的纯化是关键的一步,所以本试验通过索大孔树脂法对钩吻生物碱纯化的最优条件,进行了大孔树脂法钩吻生物碱洗脱液预试验,选定四因子如下:样品pH值(A)、30%乙醇冲洗液(B)、100%乙醇洗脱液(C)和提取液阶段(D),进行四因子三水平的正交试验设计L9~((3^4))。同时本试验选用肖洒(2016)硕士学位论文“钩吻粗提物的含量测定与主要生物碱的体外代谢研究”中对钩吻粗提物进行钩吻素子、钩吻素甲含量测定获得的检测方法,对大孔树脂法纯化获得的钩吻生物碱样品进行钩吻素子、钩吻素甲含量测定。结果:从本对比试验可知钩吻粗提取后其中生物碱含量醇提物酸水提物水提物,三种溶剂提取法的生物碱含量百分比分别为2.15、6.44、0.57。从正交试验的极差分析与方差分析的结果可以得出,钩吻生物碱纯化受冲洗液乙醇浓度、洗脱液乙醇浓度和pH值的影响。根据吸光度值与标准的钩吻素甲量的线性回归方程:y=0.0055x+0.2236(R2=0.98565)计算得出,钩吻生物碱大孔树脂法纯化后的纯度为92%。同时试验通过高效液相色谱法检测大孔树脂法纯化样品中的钩吻素甲含量为24.65%、钩吻素子含量为16.39.%,钩吻素甲的含量钩吻素子的含量。结论:对比试验可知钩吻粗提取后其中生物碱含量醇提物酸水提物水提物。比较不同溶剂提取的钩吻粗提物得率不同。从正交试验的极差分析与方差分析的结果可以得出,其中大孔树脂法对钩吻生物碱纯化的最优组合为A1、B2、C3和D2,即样品调节pH8、冲洗液为30%乙醇、洗脱液为100%乙醇和第二阶段提取溶液为最优组合。最优组合得出的样品钩吻生物碱纯化分离纯度可以达到92%。分析检测本实验大孔树脂生物碱最优纯化条件所得样品中,钩吻素甲所占含量为24.65%,钩吻素子所占含量为16.39%,其中本试验中钩吻生物碱的钩吻素甲含量高于钩吻素子。这结果与俞昌喜等(2012)测得的国产钩吻生物碱中钩吻素子含量最高的观点不一致。
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S853.7

【参考文献】