不同类型抗氧化剂对冷冻保存猪精子的保护作用

发布时间：2020-05-16 20:26

【摘要】：猪精子因其结构的特殊性,对冷冻过程中的氧化应激反应异常敏感。能够在猪精子冷冻-解冻过程中稳定发挥作用,保护猪精子免受氧化损伤的高效抗氧化剂仍在寻找过程中。精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸都是天然、高效的抗氧化剂,且都尚未在精子冷冻领域得到过研究与应用。本试验的主要目的就是检测精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸在冷冻-解冻过程中是否对猪精子具有保护作用。来自5头长白种公猪的精液样品被用于本试验研究,将每次采得的5头公猪的精液进行混合并分成若干个组,向每组中单独或配伍添加不同浓度的精胺、香菇多糖、芹菜素和阿魏酸,然后分别检测冷冻-解冻后猪精子的活力、活率、质膜完整性、线粒体活性、顶体完整性、超氧化物歧化酶(SOD)活力、过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)浓度,最后将解冻后精子质量较高的实验组精子与体外培养成熟的卵母细胞进行体外受精试验。获得如下结果:1.在猪冷冻稀释液中添加一定浓度的精胺,可以显著提高解冻后精子的活力、活率、质膜完整性、线粒体活性、顶体完整性和内源抗氧化酶活力(SOD和CAT),并显著降低MDA浓度(P0.05),当精胺浓度为3mM时,提升效果最明显,但精胺对解冻后精子活力的提升效果维持时间较短。2.在猪冷冻稀释液中添加一定浓度的香菇多糖,对解冻后精子的活力、活率、质膜完整性和顶体完整性提升效果较明显(P0.05),最适的添加浓度为0.6-0.9mg/mL。香菇多糖缺乏针对精子细胞内部的抗氧化作用,无法显著提高解冻后精子的线粒体活性和抗氧化酶(SOD和CAT)活力。3.在猪冷冻稀释液中分别添加一定浓度的芹菜素和阿魏酸,都可以显著提高解冻后精子的活力、活率、质膜完整性、线粒体活性、顶体完整性和抗氧化酶(SOD和CAT)活力,并显著降低细胞内MDA浓度(P0.05),芹菜素的最适添加浓度为0.2mM,阿魏酸的最适添加浓度为0.25mM。4.芹菜素和阿魏酸在冷冻过程中对猪精子具有协同的保护作用,配伍添加后可以进一步提升解冻后猪精子的各项质量参数(P0.05),最适添加浓度为0.1mM芹菜素加0.15mM阿魏酸,且在此浓度下,解冻后精子活力和活率在2h内不会显著下降(P0.05)。5.香菇多糖、芹菜素和阿魏酸在各自的最适浓度下都可以帮助提高冷冻-解冻后猪精子的受精能力,进而提升体外受精试验后受精卵的卵裂率。在冷冻稀释液中配伍添加0.6mg/mL的香菇多糖、0.1mM的芹菜素和0.15mM的阿魏酸,以解冻后的精子进行体外受精试验,受精卵的卵裂率可被进一步提高(P0.05)。
【图文】：

精胺,结构式,脂肪胺类,低级醇

精胺结构式Fig.2-1.Structuralformulaofspermine

芹菜素,结构式,酚酸类,羟基肉桂酸

图 4-1 芹菜素结构式Fig. 4-1. Structural formula of apigenin氧基-4-羟基肉桂酸，是一种天然的酚酸类物草药中的有效活性成分。动物实验证明阿魏酸
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S828

【参考文献】