紫茎泽兰甲醇提取物制备条件优化及其对鸡皮刺螨杀灭活性的评价

发布时间：2020-05-22 07:16

【摘要】：近年来,人们逐渐开始追求品质安全、风味优良的鸡肉,林下散养、山地放养等生产方式逐渐兴起。但是规模化山地放养的养殖模式,极有利于鸡体表寄生虫的感染。常见的鸡体表寄生虫包括虱、螨、蚤、蜱等,一旦爆发,对养鸡业的危害不亚于其他疾病。当前食品安全越来越受到重视,常用的化学合成杀虫药物受到限制,所以寻求安全有效、环境友好又不影响鸡肉品质的防治药物是十分必要的。植物药物是天然的活性物质,具有无残留、毒性低、来源广泛的优点。本实验以紫茎泽兰为研究对象,通过正交试验优化紫茎泽兰的甲醇提取物的提取方法,并用高效液相的方法研究其9-羰基-10,11-去氢泽兰酮(Euptox A)的含量。研究不同浓度的甲醇提取物对鸡螨虫的离体杀灭作用,旨在为鸡体表寄生虫防制给出有用建议,其次是为合理开发利用紫茎泽兰,变害为宝提供参考。1.紫茎泽兰甲醇提取物条件优化用L9(3~4)正交表进行试验设计优化,以紫茎泽兰甲醇提取物(浸膏)的提取率为指标,考察甲醇浓度(A)、浸泡时间(B)、浸泡次数(C)、料液比(D)对其提取率的影响。结果显示,紫茎泽兰甲醇提取物提取率最高的组合条件为A_3B_3C_2D_1,即在甲醇浓度80%、浸泡时间48h、浸泡3次、料液比1:4时可获得最大提取率。观察结果可知,各影响因素的主次顺序为:CADB,即浸泡次数甲醇浓度料液比时间,浸泡时间(B)因素对试验结果影响不大。2.高效液相色谱法分析Euptox A的含量本试验将正交试验所得紫茎泽兰甲醇浸膏通过高效液相色谱法检测其中Euptox A的含量。结果显示Euptox A出峰时间为:12.338min。通过面积归一法计算不同提取条件下紫茎泽兰甲醇浸膏中Euptox A的含量,可知在紫茎泽兰甲醇提取物制备条件优化试验中的提取条件为A_2B_2C_3D_1即甲醇浓度为70%、浸泡时间36h、浸泡4次、料液比1:4时其Euptox A的含量最高。3.紫茎泽兰甲醇提取物杀灭鸡皮刺螨活性的评价本试验利用在紫茎泽兰甲醇提取物制备条件优化试验中的提取条件为A_2B_2C_3D_1即甲醇浓度为70%、浸泡时间36h、浸泡4次、料液比1:4的紫茎泽兰甲醇提取物,以10%吐温-80作为溶剂,配制成4 mg/mL、8 mg/mL、16 mg/mL低、中、高三组浓度药液,以2%伊维菌素作为阳性对照组,10%吐温-80为溶剂对照组研究紫茎泽兰甲醇提取物对鸡皮刺螨的离体杀灭作用。结果显示,紫茎泽兰甲醇提取物浓度在4 mg/mL、8 mg/mL、16 mg/mL下对鸡皮刺螨的杀灭率与溶剂对照组比较差异显著(p0.05),在作用1h时阳性组作用显著高于各浓度组,浓度为16 mg/mL的提取物对鸡皮刺螨的杀灭率达到50%。在4h时阳性组与各浓度组相比无显著差异,且三浓度梯度对鸡皮刺螨的杀灭率均大于60%。在8h时阳性组作用与各浓度组相比无显著差异,浓度为16 mg/mL对鸡皮刺螨的杀灭率达到100%。作用相同时间内,离体杀灭率随着甲醇提取物药物浓度的增大而增大。采用CLL模型分析紫茎泽兰甲醇提取物对鸡皮刺螨的体外毒性,结果显示:紫茎泽兰甲醇提取物对鸡皮刺螨在4 mg/mL、8 mg/mL和16 mg/mL时的LT_(50)分别为2.096h,1.444h,1.119h,随着浓度的增大,LT_(50)的值逐渐减小。鸡皮刺螨在1 h、4 h和8h时的LC_(50)分别为15.498mg/mL、2.269 mg/mL、0.732mg/mL,结果表明,紫茎泽兰甲醇提取物具有较强的杀鸡皮刺螨活性,有潜力作为杀鸡皮刺螨的新药物开发。
【图文】：

色谱图,色谱图,标样

EuptoxA标样色谱图

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图 3-2 紫茎泽兰提取物色谱图Fig. 3-2 Chromatogram of extracts from Eupatorium adenophorum
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S858.31

【参考文献】