沙葱黄酮对氧化应激小尾寒羊肝脏的保护作用及其机制研究

发布时间：2020-05-25 02:53

【摘要】：本论文以Diquat诱导小尾寒羊产生的氧化应激为试验动物模型,研究了沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊肝脏中抗氧化酶、抗氧化物质、肝脏线粒体功能以及线粒体呼吸链复合物相关基因表达的影响,旨在探讨沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊氧化应激的保护作用及其机制。主要研究内容及结果如下:试验1,沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊肝脏抗氧化指标的影响。选择15只体重在40±5 kg左右的小尾寒羊母羊,随机分为三组,即对照组、沙葱组和黄酮组,每组5只。试验期第1Id开始,对照组饲喂基础日粮,沙葱组和黄酮组分别在基础日粮中添加1 g/只/d沙葱粉和120 mg/只/d黄酮进行饲喂。在试验期的第30 d对各组试验羊按10 mg/kg BW—次性腹腔注射Diquat溶液,继续饲喂12 d；并在第42 d，每组随机选取3只羊经屠宰后采取肝脏组织,测定肝脏中SOD、CAT、GSH-Px及XOD活性,MDA、GSH含量和T-AOC等指标。结果表明:饲喂沙葱及沙葱黄酮可通过提高小尾寒羊肝脏中SOD、CAT及GSH-Px活性和GSH的含量、抑制XOD的活性和降低MDA的产生来保护Diquat对小尾寒羊产生的氧化损伤,且沙葱黄酮的保护效果显著高于沙葱(P0.05)。试验2,沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊肝脏线粒体功能的影响。在试验1的基础上,本试验采用分子生物学方法,从线粒体功能的角度探讨了沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊肝脏抗氧化应激的作用机制,利用比色法定量检测线粒体呼吸链复合物I、II和线粒体ATP酶活性;荧光分光光度法测定线粒体内ROS含量；流式细胞术检测线粒体膜电位。结果表明,饲喂沙葱及沙葱黄酮可通过降低Diquat诱导的小尾寒羊肝脏中线粒体内ROS的水平,提高肝脏中线粒体ATP酶、线粒体呼吸链复合物II活性和线粒体膜电位的水平来发挥改善Diquat诱导的小尾寒羊肝脏线粒体功能的作用,且沙葱黄酮的改善作用显著高于沙葱(P0.05)。试验3,沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊肝脏线粒体呼吸链复合物相关基因表达的影响。本试验利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,探讨了沙葱及沙葱黄酮对Diquat诱导的小尾寒羊肝脏中SDH相关基因(SDHA、SDHB、SDHC及SDHD)表达量的影响。结果表明,沙葱组和黄酮组小尾寒羊肝脏中SDHA的表达量显著高于对照组(P0.05),且黄酮组小尾寒羊肝脏中SDHA的表达量显著高于沙葱组(P0.05)。黄酮组小尾寒羊肝脏中SDHB、SDHC、SDHD基因的表达显著高于对照组和沙葱组(P0.05)。综上所述,饲喂沙葱及沙葱黄酮均能保护Diquat对小尾寒羊引起的肝脏氧化损伤,其保护机制可能是与其通过清除体内的自由基,维持体内抗氧化酶与抗氧化物质的平衡和保护线粒体功能而实现的,且沙葱黄酮的保护作用优于沙葱。
【图文】：

图１技术路线图逡逑Ｆｉｇ．邋１邋Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ邋ｒｏｕｔｅ逡逑

逦内蒙古农业大学硕士学位论文逦２９逡逑３）仪器的操作逡逑完成上述步骤后，，把加好样品的９６／３８４孔板放在ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ４８０邋ＩＩ邋（Ｒｏｃｈｅ罗逡逑氏）中进行反应。逡逑２．邋３．邋２．邋５数据分析逡逑采用２＿ＡＡａ方法对数据进行相对定量分析，并将得出的数据同试验２１２邋３的方逡逑法进行分析。逡逑２．３．３试验结果逡逑２．３．３．１邋ＧＡＰＤＨ、ＳＤＨＡ、ＳＤＨＢ、ＳＤＨＣ、ＳＤＨＤ基因荧光定量扩增曲线及溶解曲逡逑线逡逑
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S826.5

【参考文献】

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本文编号：2679441