过敏毒素C5a和C3a在微小隐孢子虫感染中的表达分析

发布时间：2020-05-26 06:21

【摘要】：为明确过敏毒素C5a和C3a在小鼠感染和清除隐孢子虫(Cryptosporidium)感染过程中的作用,本研究以微小隐孢子虫(C.parvum)为研究对象,以BALB/c小鼠为感染模型,采用实时荧光定量PCR分析了C.parvum感染小鼠的小肠相关淋巴组织和脾脏中过敏毒素C3a、C5a及其相应受体(C3aR和C5aR)的mRNA水平。结果显示,在脾脏和小肠中,不仅过敏毒素C5a和C3a在感染后出现了显著上调表达,其受体C5aR和C3aR的表达水平在感染后亦显著上调表达(P0.05),并呈现动态变化。这些研究结果提示C5a/C5aR和C3a/C3aR信号参与了宿主抗微小隐孢子虫感染的过程。
【图文】：

１．４．５数据分析利用ＧｒａｐｈＰａｄ５．０采用Ｏｎｅ－ＷａｙＡＮＯＶＡ分析法对数据进行分析，Ｐ＜０．０５为差异显著。２结果２．１Ｃ５ａ和Ｃ５ａＲ在小肠相关淋巴组织和脾脏中的表达变化提取的总ＲＮＡ经琼脂糖凝胶电泳上检测（图１）质量良好，能够用于随后的分析。感染Ｃ．ｐａｒｖｕｍ的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠肠道相关淋巴组织（图２Ａ、Ｂ）和脾脏（图２Ｃ、Ｄ）中Ｃ５ａ和Ｃ５ａＲ的ｍＲＮＡ的表达水平显著上调。在小肠相关淋巴组织中，Ｃ５ａ表达水平在６，２４，４８ｈ和７ｄ显著上调（Ｐ＜０．０５），４８ｈ达到峰值（Ｐ＜０．０１）（图２Ａ）；Ｃ５ａＲ亦在２４ｈ及７，２１ｄ的ｍＲＮＡ表达水平显著上升（Ｐ＜０．０５），在２４ｈ达到峰值（图２Ｂ）。在脾脏中，Ｃ５ａ的ｍＲＮＡ表达水平于感染后６ｈ（Ｐ＜０．０５）开始显著升高，在感染后的１２，２４，７２ｈ及７，１４ｄ显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），，并在７２ｈ达到峰值（图２Ｃ）；Ｃ５ａＲ的ｍＲＮＡ表达水平也在感染后１２ｈ及１４，２１ｄ显著升高（Ｐ＜０．０５），并于感染后１４ｄ达到峰值（Ｐ＜０．０１）（图２Ｄ）。图１脾脏和小肠相关淋巴组织的总ＲＮＡ电泳图１．脾脏总ＲＮＡ；２．小肠相关淋巴组织电泳图；Ｍ．分子质量标准２．２Ｃ３ａ和Ｃ３ａＲ在小肠和脾脏中的表达变化感染Ｃ．ｐａｒｖｕｍ的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠肠道相关淋巴组织（图３Ａ、Ｂ）和脾脏（图３Ｃ、Ｄ）中Ｃ３ａ

４，４８ｈ和７，１４，２１ｄ均显著上升（Ｐ＜０．０５），在６ｈ已达到峰值（Ｐ＜０．０１）（图３Ｂ）。在脾脏中，Ｃ３ａ的ｍＲＮＡ表达水平于感染后的１２ｈ和７ｄ均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），在１２ｈ达到峰值（Ｐ＜０．００１）（图３Ｃ）；Ｃ３ａＲ的ｍＲＮＡ表达水平也于感染后６，１２，７２ｈ及１４，２１ｄ显著升高（Ｐ＜０．０５），并于１４ｄ达到峰值，并在清除感染后（２１ｄ）仍然显著上升（图３Ｄ）。图２Ｃ５ａ和Ｃ５ａＲ在Ｃ．ｐａｒｖｕｍ感染鼠小肠相关淋巴组织和脾脏中的表达情况Ａ．小肠相关淋巴组织的Ｃ５ａ；Ｂ．小肠相关淋巴组织的Ｃ５ａＲ；Ｃ．脾脏中的Ｃ５ａ；Ｄ．脾脏的Ｃ５ａＲ；注：＊代表Ｐ＜０．０５，＊＊代表Ｐ＜０．０１，＊＊＊代表Ｐ＜０．００１。下同３讨论Ｃ．ｐａｒｖｕｍ是一种世界性分布的人兽共患寄生原虫，严重威胁着人和家畜的健康。其感染会导致剧烈的水样腹泻，严重脱水甚至死亡［１６］，而未弄清Ｃ．ｐａｒｖｕｍ感染后宿主的免疫防御机理是现阶段无法控制和预防隐孢子虫病的主要原因。研究表明，Ｃ．ｐａｒｖｕｍ入侵机体后，机体自身的免疫效应是清除Ｃ．ｐａｒｖｕｍ感染的关键，而先天免疫的发挥对于控制急性感染具有重要作用［１７］。补体是先天免疫的重要组成部分，它作为一组参与介导免疫应答的具有酶活性的蛋白质，存在于血液及其它组织液中，其活化时产生的过敏毒素Ｃ５ａ和Ｃ３ａ也广泛分布于全身及局部感染部位，两者又可通过与其受体Ｃ３ａＲ和Ｃ５ａＲ的相互作

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2681411