山东省猪伪狂犬病流行病学调查及流行毒株检测分析

发布时间：2020-05-29 08:19

【摘要】：猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的猪的急性传染病。能引起母猪繁殖障碍、仔猪大量死亡,长期以来严重危害我国养猪业的健康发展。尤其是在2012年以后,我国各地Bartha-K61疫苗免疫猪群大规模的爆发猪伪狂犬病或处于野毒感染状态,发病猪场种猪繁殖障碍、仔猪死亡率升高。本研究主要基于对2017年1月至2018年12月送检病料和血清的检测,两年来共接收病原检测样品723份、血清检测样品8868份,根据猪群结构、地区、季节等因素对样品进行分类,通过病原学、血清学等方面系统的检测,探究该病近两年来在山东地区的流行情况,并对分离毒株的变异进化及毒力进行了检测分析。病原学和血清学的流行病学调查结果显示,在2017年度的723份临床样品中,经PCR检测82份病原阳性,阳性率为11.20%(82/732),其中第一、二、三、四季度的阳性率分别为17.48%、8.37%、10.06%和11.06%;在2018年度的557份临床样品中,经PCR检测42份为病原阳性,阳性率为7.54%(42/557),其中第一、二、三、四季度的阳性率分别为13.37%、2.87%、5.22%和8.33%,病原学检测结果表明,该病发生具有明显的季节性,冬春寒冷季节多发,且从2017至2018年度该病在山东地区的阳性率总体呈下降趋势。另外,调查发现猪场周围及猪场内部的其他疑似伪狂犬病死亡动物(狗、兔、猫、牛、羊),经PCR检测多为阴性,说明其他动物伪狂犬病的发病率极低。PRVgE抗体检测结果显示,在8668份血清中,阳性的4558份,占52.58%。经分群统计发现,2017年后备母猪的抗体阳性率最低为40.91%,这与猪场重视留种检测有关,2018年公猪的抗体阳性率最高为69.69%,经产母猪抗体阳性率与生产胎次成正比。阳性病料中分离到16株PRV,有关基因检测表明,本研究分离的毒株和国内毒株有比较高的同源性,在遗传进化关系上属于同一分支,明显区别于欧美参考株。所有的国内流行毒株(包含本研究分离株)的在gE糖蛋白的疏水残基和亲水残基上有大量的氨基酸突变位点,而且互相之间在亲水残基上都发生了较多不同的氨基酸位点突变。在gB基因的优势抗原表位上,国内流行毒株和欧美参考株依然有着大量的相同的氨基酸位点突变,而且国内流行毒株以TA1和TA2变异最为明显。TK基因的氨基酸位点突变较少,这与其基因的高度保守性有关,遗传进化关系上没有显著特点。对本研究分离的两个毒株(济南株-JNP、泰安株-TA1)进行体内外毒力检测试验结果显示,JNP株TCID_(50)和LD_(50)分别为10~(7.71)TCID_(50)/mL和10~(5.07)LD_(50)/mL,TA1株TCID_(50)和LD_(50)分别为10~(7.23)TCID_(50)/mL和10~(5.01)LD_(50)/mL,两毒株都有较强致病力互相之间未见明显差异。病毒分布情况显示小鼠的脑内含量最高,肝脏次之,TA1株各器官含量明显高于JNP株。因此我们可以得出猪伪狂犬病在山东地区存在以下几种特征:(1)在规模化猪场中广泛流行性且具有较高的感染率;(2)分离毒株与国内流行毒株有较高的同源性,但有些毒株抗原表位发生突变;(3)流行毒株具有较强的致病性。因此,在我国猪场的伪狂犬病防控工作中,研究出符合流行毒株抗原特征的高效疫苗和制定合理的猪场免疫程序及严谨的伪狂犬病净化方案迫在眉睫。
【图文】：

临床病例,灰白色

图 1 临床病例剖检病变Figure 1 pathological changes in clinical cases：A：脑膜充血、出血；B：扁桃体充血红肿，表面可见灰白色坏死灶；C:脾脏布满灰白色坏死灶；D：肝脏，布满灰白色坏死灶；E：肾脏皮质部可见针尖大出血点及灰白色坏死点；F：肾脏表面见灰白色坏死点；G：密布灰白色坏死灶；H：肺脏暗红色充血、肿胀，，并可见灰白色坏死灶。ote:A: meningeal congestion, bleeding; B: tonsillar grayish white necrotic foci; C: spleen with gray-white necrotic fociepatic congestion, covered with gray-white necrotic foci; E: kidney with gray-white necrotic spots; F: kidney with ghite necrotic spots; G: grayish white necrotic foci in the liver; H: grayish white necrotic foci in the lungs.3.2病理组织学观察结果可见到箭头所指的噬神经元现象，大脑血管周围有大量淋巴细胞和单核细胞浸现“脑血管袖套现象”（图 2A 和图 2B）；扁桃体的坏死灶内淋巴细胞核坏死崩

猪伪狂犬病,组织病理学观察,病毒粒子,棕褐色

免疫组化染色见坏死细胞的核内有棕褐色的病毒粒子（图2C）；脾脏出血、并有大量淋巴细胞坏死，坏死细胞核内有红染包涵体（图 2D），免疫组化染色见坏死的细胞核内有棕褐色的病毒粒子（图 2E 和图 2F）。
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S858.28

【参考文献】